Ni Ketut Suwiti

Lab. Histologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana

E-mail : nksuwiti@yahoo.co.id

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian deteksi kesembuhan luka pada kulit mencit (Mus musculus) pasca pengobatan daun mengkudu (Morinda citrifolia Linn.) dengan metode histologis, yakni melakukan pengamatan terhadap struktur mikroskopis. Untuk mengetahui kesembuhan luka, dibuat sediaan histologi kulit setiap minggu. Terhadap sampel dilakukan fiksasi, dehidrasi dan embedding dalam parafin selanjutnya dilakukan pemotongan dengan mikrotom ketebalan 4 - 5µ. Selanjutnya dibuat sediaan histologis dengan metode pewarnaan Harris-Haematoxilin-Eosin. Pengamatan terhadap struktur histologi dilakukan dengan mikroskop cahaya binokuler pembesaran 450X. Hasil penelitian menunjukkan pada minggu ke empat struktur histologi kulit telah normal dengan adanya lapisan epidermis,. Dermis dan hipodermis. Pada lapisan epidermis ditemukan epitel squomus komplek, folikel rambut, jaringan ikat dengan pembuluh darah arteri dan vena dan jaringan lemak

Kata kunci : Mus musculus, Morinda citrifolia Linn , struktur mikroskopis, Haematoxilin-eosin, Epidermis, Dermis, Hipodermis.

ABSTRACT

A study to detect the microscopic structure of skin wound in mice (Mus musculus) after treatment with mengkudu leaves (Morinda citrifolia Linn.), by histological methods, has been carried out. In this study were detected the level of wound healing every weeks. The samples were collected from skin with was given incision injury. The tissue samples were fixed, dehydrated and embedded in paraffin and 4 - 5 µ. sections. Harris-Haematoxilin-Eosin staining method, using to identified of histological structure. Microscopic analysis was performed using a binocular light microscope (450X). The study showed that, histological structure of normaly skin we deteted in fourth weeks ware composed by epidermis, dermis and hipodermis tissue. We observed for the presence of the ephitelial squomous complexs, hair follicles, connective tissue with vein and arteriole and adipose tissue.

Keywords: Mus musculus, Morinda citrifolia Linn , structur- microscopis, Haematoxilin-eosin, Epidermis, Dermis, Hipodermis.

PENDAHULUAN

Luka adalah kerusakan anatomi, keadaan pemisahan jaringan karena kekerasan atau trauma (Marzoeki, 1993). Keparahan luka tergantung dari besarnya trauma yang diterima oleh jaringan (Pavletic, 1992). Ditinjau dari penyebabnya dibedakan atas dua yaitu luka iris dan luka bakar. Luka iris merupakan luka yang disebabkan oleh benda tajam. Luka ini memiliki sifat : tepi-tepi luka licin, tidak terdapat hubungan antara jaringan dan tidak ada jaringan nekrosa (Marzoeki, 1993). Luka iris dapat ditemukan pada luka insisi akibat pembedahan, kesembuhannya lebih cepat dan sedikit jaringan nekrosis pada tepi-tepi luka keadaan yang berlawanan ditemukan pada luka menggunakan gunting, elektroscalpel atau laser (Fossum, 1997).

Luka bakar pada dasarnya merupakan fenomena pemindahan panas, meskipun sumber panasnya dapat bervariasi. Akibat akhir yang ditimbulkan berupa kerusakan jaringan kulit, bahkan pada keadaan cedera multisistemik dapat menyebabkan gangguan yang serius pada paru-paru, ginjal dan hati. Efek sistemik dan mortalitas yang disebabkan karena luka bakar sangat ditentukan oleh luas dan dalamnya kulit yang terkena luka (Ollstein, 1996).

Luka bakar dibedakan menjadi : derajat satu, dua dan derajat tiga. Luka derajat satu hanya mengenai epidermis luar dan secara klinis tampak sebagai daerah hiperemia dan eritema. Luka derajat dua mengenai lapisan epidermis yang lebih dalam dan sebagian dermis serta disertai lepuh, basah atau edema. Luka derajat tiga mengenai semua lapisan epidermis dan dermis serta biasanya secara klinis tampak sebagai luka kering, seringkali vena mengalami koagulasi dan dapat terlihat dari permukaan kulit (Sabiston, 1987).

Percepatan kesembuhan luka dilakukan dengan cara mempertemukan kedua sisi luka, pemberian obat-obatan seperti salep antibiotik, dibalut dengan teknik tertentu seperti menggunakan hidrogel (Thomas, 1997; Fossum, 1997) atau dengan teknik vakum (tenaga negatif) di atas luka dalam beberapa menit (Thomas, 2001). Selain cara di atas kesembuhan luka dapat dilakukan dengan menggunakan obat tradisional.

Pengobatan dengan cara tradisional sebagai alternatif untuk mendapatkan kesembuhan akhir-akhir ini banyak digunakan. Salah satunya adalah pengobatan dengan menggunakan mengkudu. Mengkudu (Morinda citrifolia Linn.) banyak dimanfaatkan untuk pengobatan karena diyakini dapat meningkatkan daya tahan tubuh, menormalkan tekanan darah, antikanker, antitumor, analgesik, antiradang, antibakteri, dan mengatur siklus energi tubuh (Tadjudin dan Iswanto, 2002). Oleh karena itu mengkudu sering digunakan sebagai obat batuk, asma, tuberculosis, gangguan pernapasan, radang tenggorokan, sakit gigi, sariawan, cacingan, diare, radang usus, radang sendi, keram saat menstruasi, datang bulan tidak lancar, membantu kesehatan saat hamil dan persalinan, penghilang rasa sakit kepala, kencing manis, maupun sebagai campuran makanan (Bangun dan Sarwono, 2002). Sejauh ini pemanfaatan mengkudu diatas sebatas pada buahnya, sehingga menarik untuk diteliti apakah bagian lain dari mengkudu dapat dimanfaatkan sebagai obat.

Selain buahnya, daun dari tanaman tersebut diyakini memiliki banyak manfaat tetapi belum mendapat perhatian, sehingga penelitian ini menarik untuk dilakukan. Sampai saat ini belum ada penelitian yang mengungkapkan khasiat daun mengkudu, terutama pengaruhnya terhadap kesembuhan jaringan kulit yang mengalami luka.

METODE PENELITIAN

Materi Penelitian

Penelitian menggunakan 40 ekor mencit (Mus musculus) dibagi ke dalam dua kelompok. Kelompok satu adalah mencit dengan luka pada kulit yang dobati dengan vaselin sebagai kontrol dan kelompok dua luka pada kulit yang diobati daun mengkudu. Tiap perlakuan diulang 5 kali dan pengamatan histologis dilakukan setiap minggu selama empat minggu. Sampel berupa kulit difiksasi dengan formalin, selanjutnya dilakukan pembuatan preparat histologis dan dilakukan pewarnaan dengan metode Hematoxylin-Eosin (HE).

Metode

Pembuatan bubuk daun mengkudu.

Daun mengkudu yang akan dibuat sediaan kering adalah daun mengkudu segar pucuk kedua. Pembuatan sediaan daun mengkudu dilakukan dengan cara sebagai berikut, daun mengkudu dihilangkan kadar airnya dengan dioven pada suhu 100^oC sampai kering. Daun mengkudu yang telah kering kemudian digerus menggunakan mortir. Hasil gerusan diayak menggunakan saringan untuk memperoleh sediaan daun mengkudu yang berupa bubuk. Kemudian dibuat konsentrasi bubuk daun mengkudu 75% dengan mencampurkan 75 gr daun mengkudu pada 25 gram vaselin.

Pembuatan luka pada kulit mencit.

Luka bakar dibuat pada bagian dorsal mencit. Sebelum dilukai rambut pada kulit dihilangkan terlebih dahulu. Luka bakar dibuat dengan menggunakan solder listrik. Solder terlebih dahulu dihubungkan dengan sumber arus dan ditunggu sampai panas. Solder yang telah panas kemudian ditempelkan selama 5 detik pada kulit daerah dorsal sampai mengenai otot (derajat tiga). Luka yang dihasilkan adalah luka bakar terbuka dengan diameter 0,5 cm. Sedangkan pembuatan luka iris dengan penyayatan pada bagian dorsal menggunakan scalpel hingga mencapai daerah hipodermis, dan sebelumnya bulunya dihilangkan..

Pengobatan pada luka

Pengobatan dilakukan segera setelah luka dibuat sesuai dengan perlakuan. Masing masing mencit diobati satu kali sehari yaitu pada pagi hari. Pengobatan dilakukan dengan cara mengoleskan secara merata vaselin sebagai kontrol dan sebagai perlakuan dengan sediaan daun mengkudu 75% pada permukaan kulit yang mengalami luka bakar. Mencit diberikan makan dan minum ad libitum.

Pembuatan Sediaan Histologis

Pembuatan sediaan histologis berdasarkan metode Luna (1968) dan Culling and Dunn (1974) yaitu sampel berupa kulit yang telah difiksasi dengan formalin 10%, didehidrasi dan berturut-turut dibersihkan dengan satu sesi larutan (formalin 10% I, formalin 10% II, formalin 10% III, alkohol 70%, alkohol 96%, alkohol absolut I, alkohol absolut II, alkohol absolut III, xylol I, xylol II, xylol III, parafin cair I, parafin cair II) dalam waktu 23 jam. Lalu dibloking dengan paraffin cair, setelah didinginkan selama 30 menit dipotong dengan mikrotom dengan ketebalan 4 – 5 ?. Sebelum dilakukan mounting terlebih dahulu dilakukan pewarnaan dengan metode Harris-hematoxylin eosin, dengan cara : Direndam dalam xylol I, II, III masing-masing selama 5 menit. Selanjutnya direndam dalam alkohol absolut I dan II selama 5 menit.

Sebelum direndam dalam Harris-haematoxylin / HE (15 menit), dilakukan perendaman dalam aquadest selama 1 menit. Sampel kembali direndam dalam aquadest (1menit), kemudian 5-7 menit dalam acid alkohol 10%, dua kali dalam aquadest selama 1menit dan 15 menit. Setelah itu diwarnai dengan eosin. Preparat yang telah diwarnai kemudian direndam dalam alkohol 96% I dan alkohol 96% II masing-masing selama 3 menit. Selanjutnya direndam kembali dalam alkohol absolut III yang dilanjutkan lagi kedalam alkohol absolut IV masing-masing 3 menit. Selanjutnya dibersihkan dalam xylol I dan xylol II selama 5 menit.

Cara Pengambilan Data

Pengamatan sediaan histologis dilakukan terhadap kulit yang telah diberikan luka dan diobati vaselin (kontrol) dibandingkan dengan luka yang diobati dengan daun mengkudu. Pemeriksaan dilakukan setiap minggu menggunakan mikroskop cahaya binokuler pembesaran 100x dan 450x. Variabel yang diamati adalah perkembangan kesembuhan luka secara histologis, yaitu dengan melakukan pengamatan mikroskopis di daerah epidermis, dermis dan hipodermis dengan mengidentifikasi keberadaan sel-sel radang, fibroblast, epitel squomus komplek, folikel rambut, jaringan ikat dengan pembuluh darah arteri dan vena, jaringan lemak dan otot skelet. Selanjutnya data dianalisis dengan analisis deskriptif kualitatif.

HASIL DAN PEMBAHSAN

Hasil.

Pada minggu pertama ditemukan sel radang. Peradangan terjadi pada semua perlakuan baik kontrol maupun daun mengkudu. Daerah luka bakar tampak sebagai suatu celah yang di dalamnya banyak terdapat akumulasi sel radang.

Gambar 1. Lapisan Epidermis kulit

Gambar 2. Struktur histologis lapisan dermis dan hipodermis pengobatan dengan daun mengkudu minggu pertama (H.E. 450X)

Pada minggu kedua gambaran histologis kulit tikus masih tampak adanya peradangan dan dapat diamati pada semua perlakuan. Pada perlakuan mengkudu selain dapat ditemukan sel radang juga mulai dijumpai adanya fibroblast.

Gambar 3.  Lapisan Epidermis kulit

Gambar 4. Struktur histologis lapisan dermis dan hipodermis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu kedua (H.E. 450X)

Pada minggu ketiga jaringan dermis telah mengalami kesembuhan, terlihat daerah luka telah menyatu, serat kolagen telah terbentuk, juga dapat ditemukan fibroblast dan pembuluh darah serta folikel rambut sebagaimana yang dapat ditemukan pada kulit normal.

Gambar 5. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga daerah epidermis dan dermis (H.E. 450X)

Gambar 6. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga (H.E. 450X)

Pada minggu keempat jaringan kulit telah sembuh secara klinis baik pada perlakuan mengkudu, maupun kontrol. Secara histologis jaringan kulit yang mengalami kerusakan telah kembali utuh ditandai dengan terbentuknya jaringan ikat berupa serabut kolagen yang kembali menyatu.

Gambar 7. Gambaran histologis kesembuhan luka minggu keempat pada perlakuan mengkudu. (H.E. 450X)

Gambar 8. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga (H.E. 450X)

Pembahasan

Pada minggu pertama kesembuhan luka ditemukan adanya peradangan pada perlakuan kontrol maupun mengkudu. Menurut Dealey (1994) respon inflamasi merupakan suatu reaksi lokal terhadap jaringan yang mengalami luka dan bagian penting dari mekanisme pertahanan tubuh serta merupakan proses penting dari kesembuhan luka. Myers (2004) menjelaskan pada saat tubuh mengalami luka, dari dinding pembuluh darah yang rusak akan dialirkan transudat untuk membloking daerah luka menyebaban terjadinya edema lokal. Platelet akan aktif melepaskan beberapa faktor pertumbuhan yang merangsang sel radang menuju ke lokasi luka. Hal tersebut menjelasakan bagaimana sel radang terditeksi pada daerah luka seperti yang ditunjukkan Gambar 1 dan 2

Pada minggu kedua kesembuhan luka pada pengobatan daun mengkudu memberi gambaran histologi yang berbeda. Dalam hal ini pengobatan dengan menggunakan daun mengkudu memberikan hasil kesembuhan yang lebih baik dibandingkan dengan kontrol, yang ditandai dengan pemunculan fibroblast. Keadaan ini menunjukkan proses kesembuhan luka telah mencapai fase rekonstruksi dimana pada fase ini sel-sel radang terutama makrofag memiliki peranan yang sangat penting untuk merangsang fibroblast menuju lokasi luka. Dealey (1994) menjelaskan proses peradangan dapat diperpanjang akibat iritasi, infeksi, iritasi, bahan asing atau mekanik. Pada kontrol kemungkinan terjadinya infeksi sangat besar karena tidak dilakukan pengobatan yang dapat mencegah infeksi, hal tersebut menyebabkan proses peradangan diperpanjang.

Minggu ketiga kesembuhan luka nyata berbeda dibandingkan dengan kontrol. Dalam waktu kurang lebih tiga minggu luka yang diobati dengan daun mengkudu tampak memperlihatkan gambaran sebagaimana jaringan dermis normal. Lapisan epidermis dan serabut kolagen telah ada dan membentuk anyaman yang menunjukkan fase kesembuhan telah mencapai tahapan maturasi (Dealey 1994). Adanya kolagen pada minggu ketiga kesembuahan luka disebabkan telah terjadinya sintesis molekul kolagen dimulai dalam reticulum endoplasmik kasar fibroblast (Parker, 1991)

Gambaran histologis kesembuhan luka pada minggu keempat telah ditemukan jaringan kulit dengan susunan yang sempurna, yakni ditemukan lapisan epidermis (stratum korneum sampai dengan basale), lapisan dermis yang ditandai dengan adanya folikel rambut dan serabut kolagen, dan lapisan hipodermis ditemukan adanya jaringan lemak, saraf dan pembuluh darah, serabut kolagen telah mengalami reorganisasi membentuk anyaman. (Dellman and Brown, 1992) Hal tersebut menunjukkan jaringan telah mencapai kesembuhan dan ditemukan fibroblast dan kolagen juga telah dapat dideteksi pada minggu keempat. Sehingga hasil penelitian ini dapat merekomendasikan daun mengkudu dapat digunakan sebagai pengobatan luka bakar maupun luka iris pada kulit mencit.

Kemampuan daun mengkudu untuk menyembuhkan luka disebabkan adanya zat anthrakinon, dimana zat tersebut berperan sebagai anti mikroba dan anti jamur. Dengan adanya zat tersebut sebagai antibakteri dapat mencegah terjadinya infeksi pada luka sehingga kesembuhan luka dapat dipercepat (Waha, 2002). Selain kandungan zat tersebut mengkudu juga mengandung proxeronin, sebagaimana yang dilaporkan oleh Heinicke (2000) zat itu berperan dalam peremajaan sel, meregenerasi sel yang rusak serta meningkatkan kerja sel. Dengan adanya proxeronin dalam daun mengkudu dapat meregenerasi sel yang rusak akibat terbakar sehingga luka dapat sembuh.

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Berdasarkan hasil deteksi histologik, luka pada kulit mencit dapat diobati dengan daun mengkudu, dan pada minggu keempat telah memberikan gambaran histologis kulit normal. Struktur histologi kulit ditandai dengan pemunculan lapisan epidermis dengan staratum basale, granulosum, spinosum dan stratum korneum, lapisan epidermis yang ditandai dengan adanya serabut kolagen, fibroblas dan folikel rambut sedangkan pada lapisan hipodermis telah dapat dideteksi pemunculan jaringan ikat longgar dengan jaringan lemak, pembuluh darah dan saraf.

Saran

Dari hasil penelitian ini dapat disarankan untuk menggunakan daun mengkudu dalam pengobatan luka iris maupun luka bakar pada kulit hewan.

DAFTAR PUSTAKA

Bangun, A.P. dan B. Sarwono. 2002. Khasiat dan Manfaat Mengkudu. Agro Media Pustaka. Jakarta

Culling, C.F.A and W.L Dunn 1974. Handbook of Histopathological and Histochemical Techniques. 3 rd. Butterworths & Co Publishes, England, New Zealand, Austria, Canada, South Africa, USA.

Dealey, C. 1994. The Care of Wound. Blackwell Science. USA

Dellman, H. D., E. M. Brown. 1992. Buku Teks Histologi Veteriner 2. Universitas Indonesia Press. Jakarta.

Fossum, T.W. 1997. Small Animal Surgery. Mosby New York. USA

Heinicke, R.M. 2000. The Pharmacologically Active Inggridient of Noni. http://www.noni.net.nz/xeronine.htm

Luna, L.G. 1968. Manual Histologic Staining Methods of Pathology. 3^rd Ed. The Blakiston Division Mc Graw-hill Book Company, New York, Toronto, London, Sydney.

Marzoeki, D. 1993. Ilmu Bedah Luka dan Perawatannya. Airlangga University Press. Surabaya

Myers, B.A. 2004. Wound Management Principles and Practice. Prentice Hall. New Jersey

Ollstein, R.N. 1996. Luka Bakar. Dalam Keterampilan Pokok Ilmu Bedah. Edisi Keempat. T.F. Nealon dan W.H. Nealon. Buku Kedokteran EGC. Jakarta.

Parker, F. 1991. Structure and Function of The Skin. In Dermatology. M. Orkin, H.I. Maibach, dan M.V. Dahl. A Lange Medical Book. USA

Pavletic, M.M. 1992. Veterynary Emergency and Critical Care Medicine. Editor Robert J. Murtaugh and Paul M. Kaplan. Mosby Year Book. Toronto. New York

Sabiston, D.C. 1987. Buku Ajar Bedah Bagian 1. Editor J. Oswari. Alih bahasa P. Adrianto dan Timan. Buku Kedokteran EGC. Jakarta

Tadjudin, H. T., H. Iswanto, 2002. Mengebunkan Mengkudu Secara Intensif. AgroMedia Pustaka. Jakarta.

Thomas, S. 1997. The Management of Extravasation Injury In Neonates. World Wide Wound.

Thomas, S. 2001. An Introduction to The Use of Vacum Assisted Closure. World Wide Wound.

Waha, M.G. 2002. Sehat Dengan Mengkudu. Editor Listiyani Wijayanti. PT. Mitra Sitta Kaleh. Jakarta

convert this post to pdf.

convert this post to pdf.]]> http://www.bulletinveteriner.com/glutathion-meningkatan-kualitas-tubulus-seminiferus-pada-mencit-yang-menerima-pelatihan-fisik-berlebih/feed/ http://www.bulletinveteriner.com/perbandingan-efek-pemberian-anestesi-xylazin-ketamin-hidroklorida-dengan-anestesi-tiletamin-zolazepam-terhadap-capillary-refill-time-crt-dan-warna-selaput-lendir-pada-anjing/ http://www.bulletinveteriner.com/perbandingan-efek-pemberian-anestesi-xylazin-ketamin-hidroklorida-dengan-anestesi-tiletamin-zolazepam-terhadap-capillary-refill-time-crt-dan-warna-selaput-lendir-pada-anjing/#comments Thu, 04 Feb 2010 23:12:16 +0000 besung http://www.bulletinveteriner.com/?p=375 COMPARISON EFFECT OF XYLAZINE-KETAMINE HYDROCHLORIDE COMBINATION WITH TILETAMINE-ZOLAZEPAM COMBINATION TO CAPILLARY REFILL TIME (CRT) AND THE MUCOUS MEMBRANES COLOUR IN DOGS

I Wayan Gorda¹, A.A. Gde Jaya Wardhita¹,

A.A. Gde Oka Dharmayudha²

¹Laboratorium Bedah Veteriner

²Laboratorium Radiologi Veteriner FKH Universitas Udayana

o_dharmayudha@yahoo.com

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dan mempelajari perbandingan pengaruh pemberian anestesi xylazin-ketamin hidroklorida dan anestesi tiletamin-zolazepam terhadap Capillary Refill Time (CRT) dan warna selaput lendir pada anjing sebelum dianestesi, saat teranestesi, dan selama teranestesi. Penelitian ini menggunakan perlakuan yang diberikan berupa ; dosis I (2 mg/kgBB Xylazin ; 15 mg/kgBB Ketamin Hidroklorida) dan dosis II (20 mg/kg BB Zoletil (Zolazepam-Tiletamin)). Setiap perlakuan menggunakan 5 ekor anjing sebagai ulangan, sehingga secara keseluruhan digunakan 10 ekor anjing. Data yang diperoleh dianalisis dengan uji sidik ragam, sedangkan data dengan menggunakan skor diuji dengan uji Friedman. Hasil analisis diperoleh bahwa xylazin-ketamin hidroklorida dengan tiletamin-zolazepam terjadi peningkatan terhadap CRT dan warna selaput lendir.

Kata kunci : xylazin, ketamin, tiletamin, zolazepam, CRT,

ABSTRACT

This study is to determine the effect of xylazine-ketamine hydrochloride combined with tiletamin-zolazepam combination to Capillary Refill Time (CRT), paleneus of mucous membranes, heart pulse frequency and pulse before anesthesion, when anesthezed and during anesthetion. The experimental was carried duct on local dog.

The experimental design has 2 treatments : dose I (2 mg/kg body weight of xylazine hydrochloride ; 15 mg/kg body weight of ketamine hydrochloride) and dose II (20 mg/kg body weight of zoletil). Each of treatment use 5 local dogs and total of 10 dogs for all of the treatments. Data were analyzed by analysis of varience test and the score data analyzed by friedman test. A results showed the combination of xylazine-ketamine hydrochloride and tiletamin-zolazepam combination could increase to Capillary Refill Time (CRT) and mucous membranes colour.

Key word : xylazine, ketamine, tiletamine, zolazepam, CRT,

PENDAHULUAN

Salah satu anestesi umum yang sering digunakan pada anjing yaitu kombinasi Xylazin-Ketamin Hidroklorida. Xylazin Hidroklorida merupakan analgesik dan sedatife yang mempunyai efek relaksasi otot yang baik. Sedangkan Ketamin Hidroklorida sering disebut sebagai “dissiosiative anaesthetic” dengan efek menimbulkan kekakuan otot yang tinggi pada waktu pemulihannya, maka dalam penggunaannya biasanya dikombinasikan dengan Xylazin yang memiliki perelaksasi otot sehingga dapat mengurangi kekakuan otot yang dihasilkan agen dissiosiatif (Booth dkk., 1997; Hall dan Clarke, 1983).

Kombinasi Xylazin-Ketamin Hidroklorida mempunyai keuntungan yaitu ekonomis, pemberiannya mudah baik secara intravena maupun intramuskuler, induksi yang cepat dan pemulihannyapun cepat (Warren, 1983). Menurut Walter (1985), kombinasi Xylazin-Ketamin Hidroklorida merupakan agen kombinasi yang saling melengkapi antara efek analgesik dan relaksasi otot serta sangat baik dan efektif untuk anjing karena memiliki rentang keamanan yang lebar. Cullen (1991), menyatakan bahwa kombinasi kedua anestesi ini akan menimbulkan peningkatan yang bervariasi pada pulmonum, hipertensi sistemik, penurunan curah jantung, hypoventilasi yang menyebabkan peningkatan tekanan karbondioksida dan tekanan oksigen arteri.

Selain Xylazin-Ketamin Hidroklorida tersedia pula kombinasi anestesi lain yang dapat digunakan pada anjing yaitu Tiletamin Hidroklorida dengan Zolazepam. Zolazepam merupakan derivate Benzodiazepin terbaru dan merupakan antikonvulsi yang efeknya dua hingga tiga kali lebih tinggi dibandingkan dengan golongan Diazepin. Tiletamin mempunyai efek kataleptik dan bersifat lipofilik sehinggga lebih cepat didistribusikan ke organ bervaskularisasi tinggi terutama otak (Mullen, dkk.,1987; Virbac, 1992). Gabungan Tiletamin dan Zolazepam (Zoletil) dengan perbandingan 1:1 akan meningkatkan kualitas dari masing-masing zat penyusun dan menghilangkan efek-efek negatif dibandingkan dengan penggunaan secara terpisah (Booth, dkk., 1977). Wilson , dkk., (1993), menyatakan bahwa Tiletamin dan Zolazepam merupakan cardiostimulator, yaitu agen yang dapat merangsang kerja jantung.

MATERI DAN METODE

Materi

Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian ini adalah anjing jantan lokal dengan berat badan berkisar antara 7-10 kg sebanyak 10 ekor. Sebelum dilakukan tindakan anestesi terlebih dahulu dilakukan pemeriksaan fisik dan diadaptasikan selama satu minggu. Bahan dan obat-obatan yang dipakai adalah alkohol 70%, kapas , Ketamin Hidroklorida (100mg/ml), Xylazin Hidroklorida (20 mg/ml), gabungan Tiletamin-Zolazepam (Zoletil 50^® Virbac, Perancis), dan Atropin sulfat (0,25 mg/ml). Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat suntik sekali pakai 3 ml dan 5 ml, pinset, alat pengukur waktu (stopwatch) dan timbangan.

Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola Split in time dengan dua perlakuan yaitu XK 2:15 dan Z 20, secara berturut-turut menggunakan dosis 2 mg/kgBB Xylazin dengan 15 mg/kgBB Ketamin Hidroklorida dan 20 mg/kg BBZoletil (Zolazepam-Tiletamin).

Hewan percobaan yang dipergunakan adalah anjing jantan lokal yang pada pemeriksaan fisik dinyatakan sehat, sebelum dilakukan anestesi hewan percobaan dipuasakan selama 12 jam.

Variabel yang Diamati

Variabel yang diamati dalam penelitian ini meliputi Capillary Refill Time (CRT) yang diamati dengan menekan gusi anjing menggunakan jari hingga gusi dibawah daerah penekanan menjadi pucat, kemudian jari dilepaskan dan hitung kembalinya warna gusi seperti semula dengan menggunakan stopwatch (Greene, 2002), serta pengamatan warna selaput lendir (dengan skor : 3 = merah, 2 = normal, 1 = pucat). Variabel ini diamatai sebelum dianestesi, saat teranestesi, 30 menit, 60 menit, dan 90 menit periode teranestesi. Data kuantitatif dari penelitian ini dianalisis dengan sidik ragam, dilanjutkan dengan Uji Wilayah berganda Duncan bila hasilnya berbeda nyata (Steel dan Torrie, 1989), sedangkan data dengan menggunakan skor diuji dengan Uji Friedman (Nasoetion dan Barizi, 1976).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Total Nilai CRT

Rata-rata total nilai CRT (Tabel 1) dari pemberian anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida dengan Tiletamin-Zolazepam adalah 1,68 detik dan 1,17 detik dengan rata-rata masing-masing perlakuan 30 menit sebelum dianestesi ( T-30), saat mulai teranestesi (T0), saat teranestesi 30 menit (T30), 60 menit (T60), dan 90 menit (T90) adalah 1,46 detik, 1,51 detik, 1,40 detik, 1,36 detik dan 1,39 detik.

Hasil sidik ragam pada Tabel 2 menunjukkan bahwa perlakuan yang diberikan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap nilai CRT anjing jantan lokal, selanjutnya interaksi antara waktu dan perlakuan juga menunjukkan pengaruh yang sangat nyata (P<0,01) terhadap nilai CRT anjing jantan local, namun waktu pengamatan memberikan hasil tidak berbeda nyata (P>0,05) terhadap nilai CRT pada anjing jantan lokal.

Tabel 1. Hasil Rata-Rata Total Nilai CRT Anjing Jantan Lokal

Total Skor Warna Selaput Lendir

Rata-rata total skor warna selaput lendir ( Tabel 4) dari pemberian anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida dengan Tiletamin-Zolazepam adalah 1,76 dan 2,2 dengan rata-rata masing-masing perlakuan 30 menit sebelum dianestesi (T-30), saat mulai teranestesi (T0), saat teranestesi 30 menit (T30), 60 menit (T60), dan 90 menit (T90) adalah 2,0, 1,9, 2,5, 2,0 dan 2,0.

Table 2. Hasil Rata-Rata Total Skor Warna Selaput Lendir Anjing Jantan Lokal

4.1.4 Hasil Uji Friedman Terhadap Skor Warna Selaput Lendir Anjing Jantan Lokal

Hasil Uji Friedman (Tabel 5) terhadap skor warna selaput lendir anjing jantan local menunjukkan bahwa perbedaan perlakuan berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap warna selaput lendir. Pada kedua perlakuan (Tabel 6 dan Tabel 7) menunjukkan T-30 berbeda nyata (p<0,05) terhadap T0 namun tidak berbeda nyata terhadap T30, T60 dan T90.

Tabel 3. Hasil Uji Friedman Terhadap Skor Warna Selaput Lendir pada Pemberian Anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida

Keterangan : Nilai dengan huruf tidak sama menunjukkan berbeda nyata ( P<0,05 )

Pembahasan

Pemberian kombinasi anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida terjadi peningkatan nilai CRT disbanding control (T-30) dan mengalami penurunan kembali pada T (30) sampai T (90). Pada perlakuan II yaitu pemberian anestesi Tiletamin-Zolazepam diperoleh hasil penurunan nilai CRT pada T (0) – T (30) dan nilai CRT kembali meningkat pada T(60)- T(90). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa perbedaan perlakuan yang diberikan berpengaruh terhadap nilai CRT. Peningkatan nilai CRT pada pemberian anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida disebabkan karena Xylazin-Ketamin Hidroklorida menekan pusat vasomotor di bagian perifer yang menyebabkan vasodilatasi, dan dapat menurunkan curah jantung serta tekanan darah (Jones, 1957). Akibat curah jantung yang menurun dan vasodilatasi terjadi pula penurunan aliran darah yang berakibat nilai CRT menjadi lebih panjang.

Penurunan nilai CRT pada perlakuan II disebabkan oleh efek Tiletamin-Zolazepam dapat mencapai jantung dan merangsang saraf simpatis dimana kombinasi Tiletamin-Zolazepam dapat menyebabkan takikardia dan berpengaruh terhadap tekanan darah arteri dan curah jantung (Einstein, dkk., 1994). Hal ini sesuai dengan info dari Virbac, (1992) yang menyatakan bahwa anestesi Tilatemin-Zolazepam pada anjing dapat menimbulkan takikardia, peningkatan tekanan darah yang bersifat sementara dan induksi polipnea. Penurunan nilai CRT disebabkan karena anestesi Tiletamin-Zolazepam merangsang kerja jantung lebih kuat sehingga curah jantung meningkat dan aliran darah ke perifer meningkat sehingga akan mengakibatkan CRT lebih cepat.

Pada warna selaput lendir, dengan pemberian kombinasi anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida terjadi kepucatan saat anjing mulai teranestesi (T0) sampai T30 dan kembali normal pada T60-T90. sedangkan pada pemberian kombinasi Tiletamin-Zolazepam, warna selaput lendir merah saat teranestesi (T0) sampai T30 dan kembali normal T60. dari hasil penelitian ini menunjukkan bahwa perbedaan perlakuan berpengaruh terhadap warna selaput lendir (P<0,05).

Kepucatan yang terlihat pada selaput lendir dengan pemberian kombinasi anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida dapat disebabkan oleh vasodilatasi pembuluh darah sehingga dinding pembuluh darah menipis dibandingkan saat berkontriksi, akibatnya volume darah beredar berkurang dan warna merah dari darah tidak tampak jelas sehingga warna selaput lendir terlihat pucat. Di samping itu kepucatan selaput lendir dapat disebabkan oleh penurunan aliran darah yang mengalir pada daerah tersebut.

Pada pemberian anestesi Tiletamin-Zolazepam selaput lendir berwarna merah pada saat teranestesi. Hal ini disebabkan karena Tiletamin-Zolazepam merupakan cardiostimulator, yaitu agen yang dapat merangsang kerja jantung (Wilson, dkk., 1993). Bila kerja jantung meningkat maka curah jantung akan meningkat dan aliran darah ke perifer juga meningkat sehingga dapat dimanifestasikan dengan warna selaput lendir yang merah.

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

1. Pemberian anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida dengan anestesi Tiletamin-Zolazepam menimbulkan efek peningkatan terhadap nilai CRT dan warna selaput lendir pada anjing jantan lokal

2. Efek pemberian anestesi Xylazin-Ketamin didapatkan nilai CRT lebih panjang dan warna selaput lendir lebih pucat pada saat anjing mulai teranestesi dibandingkan dengan pemberian anestesi Tiletamin-Zolazepam.

Saran

Berdasarkan hasil penelitian ini anestesi Xylazin-Ketamin Hidroklorida (2mg/kg BB;15mgBB) maupun Tiletamin-Zolazepam (20mg/kgBB) aman digunakan pada anjing lokal karena efek yang ditimbulkan terhadap CRT dan warna selaput lendir masih dalam batas normal

DAFTAR PUSTAKA

Booth, N.H., D.M. J.I. Mayer, dan L.E. McDonald. (1977). Veterinary Pharmacology. The Iowa State University Press. USA. P. 295-297.

Cullen, L.K. (1991). Lecture Notes on Veterinary Anesthesia. Murdoch University. Australia. P. 25-28

Einstein, J.R., Krifton and Starner. (1994). Principles of Veterinary Therapeutics. Longman Scientific and Technical. P. 126

Greene, A. (2002). Medical Encyclopedia. Dehydration. Verimed Healthcare Network.

Hall, L.W. dan K.W. Clarke. (1983). Veterinary Anasthesia. ELBS and Bailliere Tindal. London

Jones, L.M. (1957). Pharmacology and Therapeutics. Iowa State University Press. USA. P : 149-167.

Mullen, J.M., J. Lehman , R. Bohacek, dan R.S. Fisher. (1987). Tiletamine is a poten Inhibitor of N-Methyl-Aspartate Induced Depularization in Rat Hipocampus and Stiatum. J.Pharmacol, Exp. Ther. 243 (3) : 915-200. (Medline).

Nasoetion, A.H. dan Barizi. (1976). Metode Statistika. PT. Gramedia Jakarta. Indonesia.

Steel, R.G.D. dan J.H. Torrie. (1989). Principle and Procedures of Statistic. Prinsip dan Prosedur Statistik Suatu Pendekatan Biometrik. Alih Bahasa Bambang sumantri. PT. Gramedia Jakarta.

————., (1992). Zoletil Technical Dossier. Virbac. France.

Walter, H.H. (1985). Xylazin-Pentobarbital Anesthesia in Dog and It’s Antagonism Yohimbin. Am. J. Vet. Ress. 46 (4) : 852-855.

Warren, R.G. (1983). Small Animal Anesthesia. The C.V. Mosby Company. St Louis. 33 : 151-160.

Wilson, R.P., L.S. Zagon, D.R. Laracch, dan C.M. Lang. (1993). Cardivascular and Respiratory Effect of Tiletamin-Zolazepam. Pharmacol. Biochem. Behav. 44(1): 1-8. (Medline)

convert this post to pdf.

I Made Kardena

Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana-Bali

Email:madekardena@gmail.com

ABSTRAK

Sindromik surveillance dapat dijadikan sebagai salah satu alternatif dalam melakukan surveillance terhadap suatu penyakit, dimana sistem ini mempunyai potensi dapat mendeteksi pada tahap awal dari kejadian outbreak penyakit-penyakit hewan. Walaupun sindromik surveillance dikatakan memiliki kelemahan dalam mendeteksi penyakit hewan yang besifat subklinis dan spesifik, sistem ini diyakini mampu mendeteksi outbreak penyakit secara cepat termasuk penyakit-penyakit klinis epidemik. Sindromik surveillance juga sangat cocok dijadikan pilihan dalam mendeteksi penyakit di negara-negara yang sedang berkembang karena selain lebih murah, sistem ini juga mampu mengatasi kekurangan jumlah tenaga dokter hewan.

Kata Kunci: Surveillance, monitoring tahap awal, Epidemiologi

ABSTRACT

Syndromic surveillance is an alternative surveillance system which can potentially detect animal disease outbreaks in the early stages. Although syndromic surveillance has limitations for the detection of sub-clinical and specific diseases, the method has the ability to detect disease outbreaks rapidly including clinical emerging issues. In addition, syndromic surveillance is a suitable surveillance tool that can be applied in developing countries since it is a low-cost surveillance method and is an option for poorly-resourced veterinary services.

Key words: Surveillance, Early stage monitoring, Epidemiology.

INTRODUCTION

The world that we live in has changed extensively in the past few decades, with the threat of bioterrorism, an imminent influenza pandemic, massive population movement and emerging infectious diseases. These threats require surveillance system that provides adequate lead-time for optimal public response.

Surveillance system for monitoring and detecting animal diseases become an essential requirement for livestock and poultry industry. Those industries have realized when they experienced poor surveillance on their industries, there were huge financial costs in terms of losses which caused by the disease, control and eradication or trade restrictions. In fact, the costs would become higher when in some cases of the animal disease are related to human health problems and human mortalities (Rushton, 2004).

Conventional surveillance system has served public health well in detecting and responding to infectious disease outbreaks. However, this traditional surveillance system often operates with considerable delay, thus complementary surveillance systems are required to provide the necessary lead time (Doherr and Audige, 2001).

In general, most surveillance data still rely on laboratory confirmation, which provides information to identify disease clusters (Hope et al., 2006). Recently, a new method on animal disease surveillance has developed for earlier warning system than the conventional surveillance. The novel system is called syndromic surveillance. This surveillance is a type of passive surveillance which is concerned of signs or group of signs that are associated with disease infection in order to detect and report of the diseases (Buehler et al., 2003, Durrheim and Speare, 2004).

A study on syndromic surveillance states that syndromic surveillance has difficulty to detect subclinical diseases and to determine the cause of disease outbreaks because of similarity of the clinical signs with other diseases. Doherr and Audige (2001) argue that syndromic surveillance has negative ability to detect sub clinical diseases as in this method the data collection is based on the clinical signs which are showed when infection is occurred. Nevertheless, in sub clinical infection, the syndromes or clinical signs of the diseases cannot be recognized (Doherr and Audige, 2001). Additionally, diagnosis of diseases can somewhat be determined on the basis of clinical signs, but this could be misleading as clinical signs of the diseases are similar to each other. For example, highly virulent avian influenza and Newcastle disease in chickens, show almost the same symptoms like edema and congestion on the comb, loss of appetite, depression, abnormal respiratory, etc (Swine and king, 2003).

However, some researchers believe that syndromic surveillance is a method that involves collecting and analyzing statistical data on health trends that is relying on detection of clinical case features that are discernable before confirmation diagnoses are made. Prior to the laboratory confirmation of infectious diseases, ill persons or animals may exhibit behavioral patterns, symptoms, or signs that can be reported by investigators and tracked through a variety of data sources (mandl et al., 2004, Hope et al., 2006). More importantly, syndromic surveillance may overcome the weakness of the traditional surveillance that can detect animal disease outbreak faster. The method is also useful to be applied in developing countries due to its benefits as a low-cost monitoring system and an option for poorly-resourced veterinary service surveillance method.

This reviewed article is written to enhance our knowledge on health surveillance, specifically on veterinary surveillance, and to acknowledge an alternative way to do health surveillance on animal population. In addition, this article is also useful as an alternative source for a reference for further study or research on surveillance since the study on animal health surveillance needs to be improved and up dated.

Syndromic Surveillance System Can Detect Disease Outbreaks Rapidly

Syndromic surveillance can respond to outbreaks earlier than conventional surveillance which relies upon confirmation by laboratory tests. In this method, syndromes are the indicator for the earlier detection of the disease incidence either in human or animal population (Berger et al., 2006). In New York, a fully functional hospital which uses spatial, temporal and space-time scan statistic software (SaTScan) automated analyses the outbreak based on syndromes and the result can be showed virtually within 24 hours after data submission (Das et al., 2003). More over, when doing surveillance on disease outbreaks, there are many steps that have to be prepared in order to gain a valid data which is in conventional method surveillance needs longer time to be required. Pavin (2003) believe that syndromic surveillance can provide power to conduct multiple steps in the investigation simultaneously, rapidly and efficiently (Pavin, A. J., 2003). This system is also considered as a relatively method that requires short time from the beginning to establish the result on investigation.

Syndromic Surveillance is A Low-cost Surveillance Method

The syndromic surveillance technique is developed because it provides a relatively inexpensive and practical approach gathering the information required for effective animal disease control (Heffernan et al., 2004, Sloane et al., 2006). Davies, et al (2007) believe that although this method is rather a new approach surveillance which needs to be more developed, some research demonstrate syndromic surveillance technique has the ability to significantly improve the collection and management of animal health information in low-cost expenditures, yet demonstrable value to animal livestock (Davies et al., 2007). In deed, compare with active surveillance, syndromic surveillance requires lower cost for investigation. For example, in data collection, syndromic surveillance generally uses available data, which is at a lower cost than by undertaking a survey (Mostashari and Hartman, 2003).

Syndromic surveillance does not require the cost for the diagnostic kits that are commonly expensive when using laboratory confirmation. In this surveillance the diagnostic of disease from clinical symptoms have already been determined, the laboratory confirmation is not compulsory to be done. Consequently, there is no cost for laboratory materials.

Syndromic Surveillance is Possible to be An Attractive Option for Poorly-resourced Veterinary Services

In some areas, especially in developing countries, the availability of veterinary service is often limited. The limitation of veterinary service is important when undertaking active surveillance. In participatory epidemiology, veterinarians are needed to undertake surveys related to the animal health community by performing meetings or interviewing. The veterinarians generally lead the meeting and at the same time lead the interviews in the community (Hussain et al., 2005).

As with the participatory approach which is based on interaction with the farmers, syndromic surveillance does not require a high number of veterinarians. The presence of veterinarians is not at the first line because in this method the farmers are encouraged to identify and report their sick animals not only to veterinarian but also to the head of village, or department of animal health. In other words, the farmers actively report their sick animals to the authorized health animals.

CONCLUSION

Based on reviewing of some related articles, syndromic surveillance is a potential surveillance method which may improve the response of control and prevention of disease outbreaks; as it has advantages as an alternative way to do clinical surveillance in early stage, a low-cost surveillance system and an alternative option for poorly-resourced veterinary services monitoring system.

REFERENCE

Berger, M., R.Shiau,& J.Weintraub. 2006. Review of syndromic surveillance: implication for waterborne disease detection. Journal of Epidemiol Community Health, 60, 543-550.

Buehler, J., R. D.Berkelman Hartley and C.Peters. 2003. Syndromic surveillance and bioterrorism-related epidemics. Emerging infectious diseases, 9, 1197-1204.

Das, D., D.Weiss, F. Mostashari, T.Treatwell, J.Mcquiston, L.Huntwagner, A. Karpati, K.Bornschlegel, M.Seeman, R.Turcios, P.Terebuh, R.Curtis, R.Heffernan & S.Balter.2003. Enhanced drop-in syndromic surveillance in New York city following September, 11, 2001. Journal of Urban Health, 80 i76-i88.

Davies, P., S.Wayne, J.Torrison, B.Peele, B.Degroot & DW.Wray. 2007. Real-time disease surveillance tools for the swinje industry in Minnesota. Veterinaria Italiana, 43, 731-738.

Doherr, M. & L.Audige, L. 2001. Monitoring and surveillance for rare health-related events: a review from the veterinary perspective. Philosophical Transactions The Royal Society B Biological Sciences, 356, 1097-1106.

Durrheim, D. & R.Speare. 2004. Commonicable disease surveillance and management in globalised world. The Lancet, 363, 1339-1340.

Heffernan, R., F.Mostashari, D.Das, A.Karpati., M.Kulldorff & D.Weiss. 2004. Syndromic surveillance in public health practice, New York City. Emerging infectious diseases, 10, 858-864.

Hope, K., D.Durrheim, E.D’espaignet & C.Dalton.2006 Syndromic surveillance: is it a useful tool for local outbreak detection?. Jech.bmjjournal.com, 374-375.

Hussain, M., M.Malik, Z.Fatima, & M.Yousup. 2005. Participatory surveillance of livestock diseases in Islamabad capital territory. International Journal of Agriculture & Biology, 7, 567-570.

Mostashari, F. & J.Hartman. 2003. Syndromic surveillance: a local perspective. Journal of Urban Health: Bulletin of the New York Academy of Medicine, 80, i1-i7.

Rushton, J. 2004. private sector involvement in animal health surveillance systems. IN RUSHTON, J. (Ed.) Workshop on preivate sector involvement in animal health surveillance systems. Barbados, EU-CARIFORUM.

Sloane, P., J.Macfarquhar, E.Sickbert-Bennett, C.Mitchell, R. Akers, D.Weber &K. Howard.2006. Syndromic surveillance for Emerging Infections in Office Practice Using Billing Data. Annals of Family medicine, 4, 351-358.

convert this post to pdf.

STUDIES OF THE PATHOGENESIS OF JEMBRANA DISEASE BASED ON THE CHARACTERISTIC OF INFECTED CELLS IN THE LYMPHOID TISSUES AND PERIPHERAL BLOOD

I Ketut Berata

Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana

E-mail: iketutberata@yahoo.co.id

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari patogenesis penyakit jembrana pada sapi Bali, berdasarkan karakteristik sel terinfeksi dalam jaringan limfoid dan sel-sel darah tepi. Satu ekor sapi bali diinokulasi dengan virus penyakit jembrana (JDV). Pada demam hari kedua, darah tepi sapi percobaan diambil dari vena jugularis. Limfosit dari darah tepi diisolasi dengan teknik picoll. Kemudian sapi dinekropsi. Limpa, limfoglandula prescapularis dan prefemoralis diambil secara aseptik, kemudian diproses untuk pembuatan sediaan histopatologi. Untuk penghitungan persentase sel-sel terinfeksi dalam organ limfoid, sebagian jaringan limfoid dibuat suspensi dalam PBS yang selanjutnya dibuat preparat ulas pada gelas objek. Limfosit dari darah tepi, preparat ulas dan sediaan histopatologis masing-masing diwarnai dengan teknik imunoperoksidase tidak langsung. Pada pewarnaan ini, sel-sel terinfeksi JDV tampak coklat. Intensitas warna coklat diperiksa untuk menentukan tingkat infeksi. Hasil penelitian menunjukkan persentase sel terinfeksi JDV pada limpa dan limfoglandula jumlahnya sama, berkisar 9,5%. Sedangkan sel terinfeksi JDV pada limfosit darah tepi rata-rata 7%. Berdasarkan intensitas warna coklat tampak bahwa sel terinfeksi pada limfoglandula lebih kuat dibandingkan dengan pada limpa.

Kata kunci : Pathogenesis, Penyakit jembrana, Imunoperoksidase, Organ Limfoid.

ABSTRACT

The aim the research is to studi pathogenesis of Jembrana disease on Bali cattle based on the characteristic of infected cells in lymphoid tissues and peripheral blood mononuclear cells. The healthy Bali cattle was inoculated with Jembrana disease virus (JDV) (BBVet collection). After the second day of fever, the peripheral blood of experimental cattle was took jugularis vein. Lymphocyte cells from the peripheral blood was isolated by picoll-paque gradient method. Then the experimental cattle was necropsied. The spleen, praescapularis lymphnode and praefemoralis lymphnode were took by aseptically, then its were processed for to histopathological preparation. For to examine the percentage of the infected cells in lymphoid organs, the part of each lymphoid tissues were made suspension in phosphat buffer saline, then it was made smear preparation on the object glass. Those peripheral lymphocyte cells, lymphocyte smears and histopathological preparation were stained by indirect immunoperoxidase technique. The JDV infected cells was appeared brown color. The intensity of brown color was examined for to determine degree of the infection. The result showed that percentage of JDV infected cells in both spleen and lymphnodes are similarly i.e. average 9,5%. Percentage of the JDV infected cells on peripheral lymphocyte cell was average 7%. Based on the intensity of brown color was appeared that the JDV infected cells from the lymphnodes were stronger than from spleen. The conclusion is the most of the port d‘entry JDV is through the subcutaneus route.

Key words : Pathogenesis, Jembrana disease virus, Lymphoid organ.

PENDAHULUAN

Berbagai metode digunakan untuk mempelajari patogenesis penyakit atau perjalanan penyakit mulai dari tempat masuk (port d’entry) agen infeksi sampai timbulnya sakit atau kematian hospesnya. Salah satu metode yang menarik untuk digunakan mempelajari patogenesis penyakit jembrana pada sapi bali adalah berdasarkan karakteristik sel terinfeksi virus penyakit jembrana (JDV=Jembrana Disease Virus) pada organ limfoid dan darah tepi. Organ limfoid yang diperiksa adalah limpa dan limfonode superfisialis, karena organ limfoid ini paling banyak mengandung sel-sel terinfeksi JDV (Chadwick, et al, 1998). Sel-sel terinfeksi JDV pada limpa dan limfonode dilaporkan berlokasi pada parafolikel, yang menunjukkan bahwa sel terinfeksi JDV adalah limfosit T (Dharma, et al 1991). Jumlah sel terinfeksi JDV pada limpa dan limfonode diperkirakan sekitar 10-15% (Chadwick, et al 1997). Sedangkan pada darah tepi ditemukan sedikit sel terinfeksi JDV, tetapi belum dilaporkan persentasenya. Selain itu belum ada laporan penelitian tentang ukuran sel terinfeksi JDV pada limpa, limfonode dan darah tepi. Adanya perbedaan ukuran sel terinfeksi JDV sering menimbulkan perdebatan bahwa sel terinfeksi bukan limfosit T. Abbas, et al (2000) melaporkan bahwa limfosit yang terinfeksi umumnya membengkak dan ukurannya bertambah besar. Dilain pihak ukuran limfosit berkaitan dengan perkembangan sel dari yang muda menjadi dewasa. Limfosit dewasa memiliki ukuran lebih kecil (10-12 µ) dari pada yang muda (limfoblas). Sehingga sel terinfeksi JDV diperdebatkan apakah itu sel limfoblas atau limfosit B. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian tentang patogenesis penyakit berdasarkan karakteristik sel terinfeksi JDV.

Walaupun limpa dan limfonode sama-sama organ limfoid primer, tetapi banyak penelitian yang menemukan adanya variasi peran dari kedua organ tersebut. Pada penelitian inokulasi bakteri pada mencit dengan beberapa rute yang berbeda ditemukan bahwa rute intraperitoneal dan intravenus menimbulkan respon seluler yang signifikan pada limpa. Sedangkan inokulasi melalui subkutan menimbulkan respon seluler pada limfonode (Turcotte, et al, 1978). Demikian pula penelitian tentang mekanisme sel T memori dilaporkan ada peran yang berbeda antara limpa dan limfonode (Bradley, et al, 1992). Belum ada penelitian tentang variasi peran antara organ limfoid pada infeksi JDV. Penelitian bertujuan untuk mempelajari patogenesis penyakit Jembrana pada sapi berdasarkan karakteristik sel-sel terinfeksi JDV pada limpa, limfonode dan darah tepi.

MATERI DAN METODE

Penyiapan Sapi Bali

Sapi bali yang digunakan berasal dari Nusa Penida, jenis kelamin betina dan berumur 2 tahun. Sapi diadaptasikan selama 2 minggu, divaksinasi Septicemia Epizootica (SE), diberi obat cacing dan pemberian pakan serta minum secara ad libitum. Sapi dikandangkan dan dipelihara di Balai Besar Veteriner (BBVet).

Virus Penyakit Jembrana

Virus penyakit Jembrana (JDV) yang digunakan menginokulasi sapi adalah isolat Tabanan/87 yang diperoleh dari Laboratorium Bioteknologi BBVet Denpasar.

Inokulasi Sapi dengan JDV dan Nekropsi Sapi

Sapi bali yang bebas penyakit Jembrana, diinokulasi dengan suspensi limpa 15% dari sapi terinfeksi JDV. Limpa sapi terinfeksi JDV (isolat Tabanan/87) yang tersimpan pada suhu -70^oC (BBVet Denpasar), dicincang, dan kemudian digerus sampai lumat. Setelah penambahan PBS (pH.7,2) sampai konsentrasinya 15%, dan gerusan limpa ditampung dalam tabung steril. Kemudian disentrifus 3000 rpm selama 10 menit. Supernatan kemudian diambil dan dipakai untuk menginokulasi sapi sehat yang telah disiapkan. Penyuntikan dilakukan secara intramuskuler sebanyak 10 ml cairan supernatan dari suspensi limpa 15%.

Suhu tubuh sapi diukur setiap hari, dan ketika sapi menunjukkan gejala demam hari kedua (suhu rektal lebih besar 39,5^oC), maka darah tepi diambil dengan tabung yang berisi antikoagulan EDTA 5%. Limfosit yang diperoleh dari darah tepi sapi terinfeksi JDV, digunakan untuk pemeriksaan sel terinfeksi JDV. Sapi yang mengalami demam hari kedua dinekropsi dan limpa dan limfonode diambil secara aseptis. Limpa dan limfonode yang terinfeksi JDV tersebut dibuat preparat dengan cryomicrotome yang akan dipakai bahan penentuan sel terinfeksi JDV. Preparat hasil cryomicrotome dari limpa dan limfonode sapi terinfeksi JDV, diwarnai dengan teknik imunohistokimia / imunositokimia yaitu imunoperoksidase tidak langsung.

Isolasi Limfosit Darah Tepi

Sebelum sapi dinekropsi, darah tepi diambil untuk memperoleh limfosit darah tepi. Darah tepi diambil secara aseptis melalui vena yugularis dengan menggunakan venoject dan ditampung dalam tabung steril yang telah diisi antikoagulan EDTA 5%. Penghitungan total sel leukosit dan sel limfosit dilakukan dengan haemositometer. Darah ini disentrifus 2500 rpm selama 10 menit. Lapisan putih (buffy coat) di antara sel darah merah dan plasma diambil dan disuspensikan dengan media DMEM tanpa serum. Limfosit dipisahkan dari buffy coat dengan cara Ficoll-paque gradient yaitu disentrifus 3.000 rpm selama 30 menit. Lapisan limfosit diambil dan dicuci 3 x dengan media DMEM tanpa serum. Limfosit yang diperoleh, diresuspensi dan dibuat preparat ulas pada gelas objek yang telah dilapisi poly-l-lysin. Setelah kering, preparat diwarnai dengan teknik imunoperoksidase tidak langsung sesuai metode Dharma (2002).

Pembuatan Preparat Histologis Jaringan Limfoid

Limpa dan limfonode yang dipakai dalam penelitian ini berasal dari sapi bali terinfeksi JDV yang dinekropsi pada demam hari kedua. Limfonode yang diambil adalah limfonode prescapularis dan prefemoralis. Jaringan limpa dan limfonode kira-kira sebesar 1 cm³ diambil secara aseptis, dan dibekukan pada suhu -20^OC. Jaringan limpa kemudian diberi OCT (Sigma, USA), kemudian dibekukan secara cepat dengan cara mencelupkan ke dalam nitrogen cair. Jaringan yang beku tersebut kemudian dipotong dengan cryomicrotome yang diset pada suhu -20^OC. Potongan jaringan segar setebal 4-5 µm, selanjutnya ditempatkan di atas gelas objek yang telah dilapisi poly-l-lysine 0,001% (Sigma, USA). Setelah dikeringkan di udara, jaringan difiksasi dengan aseton dingin yang mengandung H₂O₂ 3%, selama 30 menit. Untuk dapat menghitung sel-sel terinfeksi JDV, maka limfosit dari limpa dan limfonode dibuat suspensi terlebih dahulu. Pelet dari suspensi diresuspensi dengan PBS (pH 7,2-7,4) dan dibuat preparat ulas pada gelas objek yang telah dilapisi poly-l-lysin.

Tahap Pewarnaan Imunoperoksidase Tidak Langsung

Untuk menentukan adanya limfosit yang terinfeksi JDV, baik dalam limpa, limfonode dan limfosit darah tepi, dilakukan uji imunositokimia dengan teknik imunoperoksidase tidak langsung sesuai prosedur Dharma (2002). Preparat ulas dari limfosit darah tepi yang telah dikeringkan pada suhu kamar, bisa langsung dilakukan pewarnaan. Preparat jaringan limfoid yang disimpan pada suhu -20^OC, dikeluarkan dan dibiarkan 15 menit pada suhu 4^OC sambil memberi kode seperlunya. Dalam suasana lembab, preparat digenangi dengan serum kambing normal 10% dalam PBS. Selanjutnya tambahkan AbMo primer berupa AbMo anti-Ca JDV (BBVet Denpasar), dengan pengenceran 1:200 dalam BSA 1%. Setelah diinkubasi selama 1 jam pada suhu kamar, dilakukan pencucian 3×5 menit dengan PBS pH 7,4. Selanjutnya preparat ulas digenangi dengan goat anti-mouse IgG-HRP (ICN-USA), dengan pengenceran 1:100. Antibodi ini berfungsi sebagai perangkai silang (cross linker) antibodi. Setelah pencucian 3×5 menit dengan PBS, preparat digenangi dengan mouse peroxidase-anti-peroxidase complex (PAP) (Sigma, USA), dengan pengenceran 1:800. Inkubasi selama 40 menit pada suhu kamar, dan kemudian dicuci 3×5 menit dengan PBS. Kemudian tambahkan substrat diamino benzidine/DAB (Sigma, USA) 0,01% dalam PBS yang mengandung 2% H₂O_2. Setelah inkubasi 6 menit pada suhu kamar, reaksi substrat dihentikan dengan cara dicuci pada air mengalir selama 15 menit. Selanjutnya diwarnai latar belakang (counterstain) dengan Mayer’s haematoksilin selama 5 menit pada suhu kamar. Mayer’s haematoksilin mewarnai inti sel, sehingga tampak berwarna biru / ungu. Limfosit yang terinfeksi JDV dengan pewarnaan ini akan tampak coklat pada sitoplasmanya dengan inti berwarna biru/ungu. Sisa warna dalam limfosit dibersihkan dengan air kran mengalir selama 5 menit. Berikutnya didehidrasi dengan alkohol absolut 2×5 menit, dan dibersihkan dengan mencelupkan ke xylol 2×5 menit. Setelah dikeringkan, preparat diisi permount dan ditutup dengan coverslip. Jumlah sel terinfeksi JDV diperiksa dan dihitung dibawah mikroskop (perbesaran 10×40) dalam 5 lapang pandang. Persentase sel terinfeksi JDV dihitung dengan rumus :

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Dalam limpa tampak pola penyebaran limfosit terinfeksi JDV yang bervariasi ukurannya. Sel limfosit yang paling banyak terinfeksi JDV ditemukan di daerah parafolikel. Parafolikel limpa merupakan lokasi dari sel limfosit T. Ada kecenderungan bahwa sel limfosit terinfeksi JDV dalam limpa membentuk pola klon multifokal. Setiap klon limfosit terinfeksi JDV mempunyai ukuran yang bervariasi mulai dari kecil yang tediri atas beberapa limfosit terinfeksi JDV, sampai klon sel besar yang terdiri atas ratusan limfosit terinfeksi JDV. Sementara jumlah limfosit terinfeksi JDV yang ditemukan di daerah folikel jauh lebih sedikit dari pada di daerah parafolikel. Karena penyebarannya yang berpola klon multifokal, jumlah limfosit terinfeksi JDV dalam limpa sulit dihitung secara akurat. Untuk tujuan penghitungan, maka dilakukan dengan cara membuat suspensi dari potongan limpa yang terinfeksi JDV. Suspensi tersebut dibuat preparat ulas di atas gelas objek yang telah dilapisi poly-L-lysin, sebelum dilakukan pewarnaan imunoperoksidase tidak langsung. Dalam limfosit darah tepi, sel terinfeksi JDV tampak mempunyai ukuran bervariasi, tetapi semua sel terinfeksi merupakan jenis sel mononuklear yang menyerupai makrofag, limfosit besar dan limfosit kecil. Kebanyakan limfosit terinfeksi JDV memiliki ukuran yang lebih besar dari pada limfosit normal (Gambar 1B)

Gambar 1. Sel limfosit terinfeksi JDV pada jaringan limfoid dan darah tepi sapi bali. Limfosit terinfeksi JDV ditandai dengan adanya warna coklat pada sitoplasma sel limfosit. A).Sel limfosit terinfeksi JDV dalam limpa ditandai dengan adanya klon sel multifokal dan setiap klon terdiri atas banyak sel terinfeksi JDV (10×5). B). Sel limfosit yang terinfeksi JDV pada darah tepi mempunyai ukuran yang bervariasi, tetapi kebanyakan lebih besar dari pada limfosit normal (10×10).

Hasil penghitungan jumlah sel terinfeksi JDV pada limpa dan limfonode rata-rata 9,5% dan limfonode rata-rata 8,5%. Tidak ada perbedaan pola dan jumlah rata-rata persentase sel terinfeksi JDV pada limfonode prescapularis dibandingkan limfonode prefemoralis. Hal yang menarik pada pewarnaan preparat jaringan limfoid adalah sel terinfeksi pada jaringan limfoid lebih coklat dan lebih mudah diperoleh dari pada limpa. Hasil ini menunjukkan ada perbedaan kualitas antara sel terinfeksi di limfonode dan di limpa. Pada limfosit darah tepi diperoleh rata-rata sel terinfeksi JDV sekitar 7%.

Pembahasan.

Adanya variasi ukuran sel terinfeksi pada limpa dan limfonode menimbulkan pertanyaan: apakah sel yang berukuran lebih besar dari pada limfosit normal tersebut bukan limfosit dewasa (limfoblas) atau justru limfosit B. Karena batas folikel (lokasi limfosit B) dengan parafolikel (lokasi limfosit T) tidak jelas (Tizard, 2002) pada limpa maupun limfonode. Pola sel terinfeksi JDV pada limpa maupun limfonode tampak semakin tidak jelasnya batas antara folikel dan parafolikel. Hal ini dilaporkan sebagai akibat folikel yang mengalami atrofi dan sel di parafolikel proliferasi (Dharma, et al, 1994). Folikel limpa merupakan lokasi limfosit B dimana sel plasma yang berperan sebagai penghasil antibodi. Atrofinya folikel ini menyebabkan tidak dapat diproduksinya antibodi pada fase akut penyakit jembrana. Sebagaimana diketahui, penyakit jembrana adalah satu-satunya penyakit oleh Lentivirus yang bersifat akut, dengan masa inkubasi virus 5-12 hari. Sehingga JDV disebutkan sebagai golongan baru dari Lentivirus (Wilcox, et al. 1995).

Berdasarkan hasil pemeriksaan antibodi terhadap penyakit Jembrana pada uji serologis diperoleh data bahwa antibodi muncul setelah minggu ke 7 (Hartaningsih, et al 2001). Hal inilah yang menyebabkan adanya imunosupresi sementara pada sapi penderita penyakit Jembrana (Wareing, 1999). Oleh karena itu proses kesembuhan sapi penderita penyakit Jembrana dilaporkan sebagai akibat respon kekebalan seluler. Pada kasus lapangan, sapi penderita dapat menunjukkan kesembuhan mulai minggu ketiga (Dharma, 1996).

Tidak adanya perbedaan pola sel terinfeksi pada limpa dan limfonode menunjukkan bahwa sel terinfeksi adalah sejenis. Demikian pula tidak adanya perbedaan antara limfonode prescapularis dengan prefemoralis menunjukkan peran yang sama kedua limfonode tersebut. Tetapi berdasarkan intensitas warna coklat, tampak sel terinfeksi pada limfonode lebih coklat yang menunjukkan adanya variasi kualitas sel terinfeksi JDV. Hal ini mungkin berkaitan dengan patogenesis penyakit Jembrana yang dilaporkan port d’entry virus adalah melalui gigitan lalat penghisap darah (Putra, 2001). Akibat rute infeksi melalui subkutan, maka analog dengan penelitian rute inokulasi bakteri dilaporkan bahwa inokulasi subkutan akan memberikan respon seluler yang lebih tinggi pada limfonode superfisialis (Turcotte, et al, 1978).

Pada sel limfosit darah tepi, JDV menginfeksi sel dengan ukuran yang bervariasi. Semua sel yang terinfeksi merupakan sel mononuklear yang menyerupai makrofag, sel limfosit besar dan kecil. Dalam limpa dan limfonode, JDV juga menginfeksi sel dengan ukuran bervariasi. Ada kecenderungan bahwa sel terinfeksi JDV dalam limpa menyebar dengan pola klon multifokal, dan paling banyak ditemukan di daerah parafolikel limpa. Ukuran klon sel yang terinfeksi JDV, bervariasi mulai dari klon kecil yang terdiri atas beberapa sel terinfeksi sampai klon besar yang terdiri atas ratusan sel terinfeksi JDV. Pola penyebaran sel terinfeksi JDV dalam limpa semacam ini telah dilaporkan oleh Chadwick, et al (1997). Sangat mungkin bahwa setiap klon sel terinfeksi JDV terdiri atas banyak sel, mulanya berasal dari satu sel subset limfosit tertentu. Sel ini kemudian membelah dan memperbanyak diri menjadi klon yang lebih besar dengan subset yang sama.

Berdasarkan variasi ukuran sel terinfeksi JDV, sepintas memang seperti limfoblas ataupun limfosit B. Tetapi jika dilihat berdasarkan mekanisme infeksi, dimana organ-organ limfoid merupakan tempat terjadinya proses interaksi virus dengan sel target, maka limfosit T merupakan sel yang beredar dalam darah tepi (Mims, 1995). Adanya ukuran limfosit yang lebih besar pada limpa, limfonode maupun darah tepi adalah akibat adanya reaksi terhadap infeksi virus. Sel yang terinfeksi agen virus umumnya terjadi pembengkakan (Abbas, et al, 2000).

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa pola sel terinfeksi JDV pada limpa dan limfonode superfisialis adalah berbentuk klon terutama di parafolikel yang menunjukkan sel T yang terinfeksi. Adanya intensitas sel terinfeksi JDV pada limfonode yang lebih kuat menunjukkan bahwa infeksi JDV lebih dominan masuknya dari daerah subkutan.

Saran.

UCAPAN TERIMA KASIH

Terimakasih penulis ucapkan kepada Prof.drh.Nyoman Mantik Astawa, PhD dan drh.N.Hartaningsih, MVSc.PhD, atas bantuan bahan dan teknik untuk penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKA

Abbas,A.K., A.H. Lichtman.,J.S Pober. 2000. Cellular and Molecular Immunology. 4^th.Ed. Saunders Co.p.161-269.

Astawa, N.M., N. Hartaningsih, D.M.N. Dharma, W.M. Tenaya, Budiantono dan W. Ekaana. 2005. Replikasi Virus Jembrana pada Kultur Limfosit Darah Tepi asal Sapi Bali. J.Vet.6(4).p.135-142.

Barrouin-Melo,SM.. DF.Larangeira, J.Trigo,PHP.. Aguiar, WL.Conrado dos-Santos, L, Lain Pontes-de-Carvalho. 2004^. Comparison between splenic and lymph node aspirations as sampling methods for the parasitological detection of Leishmania chagasi infection in dogs . Mem. Inst. Oswaldo Cruz 99(2) Rio de Janeiro Mar. 2004

Bradley, L.M. GG.Atkins,.and SL.Swain,.1992. Long-term CD4+ memory T Cell from the spleen lack MEL-14, the lymphnode homing receptor. J.of. Immunol. 148.1-7.

Chadwick, B.J., M.Desport, DMN. Dharma, J.Brownlie and GE.Wilcox, 1997. Detection of Jembrana Disease Virus in Paraffin-emmbedded Tissue Sections by In Situ Hybridization. Workshop on Jembrana Disease and the Bovine Lentivirus. Denpasar Bali. ACIAR Proceeding. No. 75. p. 66-71.

Chadwick, B.J., M. Desport, J.Brownlie, GE. Wilcox and DMN. Dharma. 1998. Detection of Jembrana Disease Virus in Spleen, Lymphnodes, Bone Marrow and Other Tissues by In Situ Hybridization of Paraffin-Emmbeded Sections. J.of General Virol. 79:101-106

Dharma, D.M.N., A.Budiantono., RSF. Campbell, and PW.Ladds. 1991. Studies on Experimental Jembrana Disease in Bali Cattle. III. Pathology. J.of.Comp.Pathol. 105 : 397-414

Dharma, D.M.N., PW. Ladds, GE. Wilcox, G.E and RSF.Campbell. 1994. Immunology of Experimental Jembrana Disease in Bali Cattle. Vet.Immunol. and Immunopathol. 44: p. 31-44

Dharma, D.M.N. 1996. The Pathology of Jembrana Disease. In : Wilcox, G.E., Soeharsono, S., Dharma, D.M.N., Copland, J.W., Editors. Jembrana Disease and The Bovine Lentiviruses. ACIAR Proceedings No. 75. p. 26-28.

Dharma, D.M.N. 2002. Teknik Imunohisokimia. In : Hartaningsih, N. Editor. Manual Diagnosa Laboratorik Penyakit Jembrana. Materi kursus peningkatan metode diagnosa penyakit jembrana. ACIAR-BPPV VI Denpasar. p.76-98.

Mims. C.A., N. Dimmock, A. Nash and A. Stephen. 1995. Mims Pathogenesis of Infectious Disease. 4^th.ed. Orlando. Academic Press p.266-282.

Putra, A.A.G.2001. Kajian Epidemiologi dan Strategi Penaggulangan Penyakit Jembrana di Indonesia. In: Hartaningsih, N. and Putra, A.A.G..Editor. Tiga Puluh Tahun Menaklukan Penyakit Jembrana. Prosiding Seminar Nasional Penyakit Jembrana. Denpasar 9 Okt.2001.p.30-50.

Tizard, I.R. 2002. An Introduction to Veterinary Immunology. W.B.Saunders Co.p.97-121.

Turcotte, R..L. Lafleur and M.Labrece.1978. Opposite Effect of BCG on Spleen and Lymph Node : Lymphocyte Proliferation and Immunoglobulin Synthesis. Infect.Immun.21(3):696-704.

Wareing, S., N. Hartaningsih, GE. Wilcox, G.E. and WJ. Penhale. 1999. Evidence for Immunosupression Associated With Jembrana Disease Virus Infection of Cattle. J.Vet.Microbiol. 68: p.179-185

Wilcox, G.E., BJ. Chadwick, and G.Kertayadnya.1995. Jembrana Disease Virus : A New Bovine Lentivirus Producing an Acute Severe Clinical Disease in Bos javanicus Cattle. Abstract in third International Conggress on Veterinary Virology, Interleken, Switzerland. 4-7 September 1994.

convert this post to pdf.

CHOLESTEROL CONCENTRATION ON SOME PARTS OF THE BODY OF THE BROILER Cockerels THAT GIVEN dietary HIGHT ricebran

Siswanto

Laboratorium Fisiologi Veteriner, Fakutas Kedokteran Hewan

Universitas Udayana, Denpasar

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh (hati, daging dada dan paha, lemak jeroan, serta kulit) pada ayam potong jantan yang diberi formula pakan dengan dedak padi konsentrasi tinggi. Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh dedak padi terhadap kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh ayam. Tiga puluh ekor ayam potong jantan jenis CP.707 umur satu hari, dibagi dalam 3 kelompok. Kelompok P0/kontrol : pakan standard), kelompok P1 diberi pakan yang mengandung dedak padi 40% dan kelompok P2 diberi pakan yang mengandung dedak padi 60%. Parameter yang diamati meliputi kadar kolesterol daging dada dan paha, hati, kulit, lemak abdominal, dan serum darah. Metode penetapan kadar kolesterol menggunakan reaksi Lieberman-Burchard. Untuk menentukan perbedaan kadar kolesterol antar perlakuan dianalisis dengan sidik ragam, bila berbeda nyata, dilanjutkan dengan uji Duncan 5%. Hasil penelitian menunjukkan, kadar kolesterol pada daging, kulit dan serum menurun nyata (P ? 0,05), sedangkan, pada hati meningkat (P ? 0,05). Pada lemak abdominal walaupun tidak berbeda nyata (P ? 0,05) namun cendrung terjadi penurunan Disimpulkan bahwa formula pakan berserat tinggi (dedak padi) berpengaruh terhadap kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh ayam.

Kata kunci : kadar kolesterol, serat, dedak, ayam

ABSTRACT

An experiment was carried out to study the cholesterol concentration on some parts of the body of the broilers cockerels that given hight ricebran supplement in the feed on cholesterol concentration of the meed, liver, serum, skin, and abdomen fat at Physiology laboratory, Udayana University, Denpasar City. The aims of the experiment was to study cholesterol concentration on some parts of the body of the broilers cockerels.Thirty broiler cockerels DOC CP 707 were randomized and divided into three treatments consisted of 40% ricebran (P1); 60% ricebran (P2); and without ricebran as controle (P0). The treatment was started at 3 weeks of age and terminated when the cockerels aged 7 weeks. Results of this experiment showed that there were significant differences decrease (P ? 0,05) of ricebran supplement on the meet cholesterol and skin cholesterol, but significant differences increase (P ? 0,05) on the liver cholesterol. And no significant differences (P ³ 0,05)on fat abdoment. The conclution that dietary ricebran influence the cholesterol concentration of the some parts of the body in broilers cockerels.

Key words : ricebrand, cholesterol, broilers cockerels.

Pendahuluan

Bagi sebagaian konsumen terutama yang terkena resiko penyakit artherosclerosis membatasi mengkonsumsi produk asal ayam, karena kandungan kolesterol di dalamnya. Untuk itu perlu dilakukan usaha untuk menurunkan kandungan kolesterol dalam produk asal ayam misalnya kolesterol dalam daging, dan telur. Dalam kaitannya dengan penyediaan produk hewan yang rendah kolesterol, tetapi tidak mengganggu pertumbuhan hewan, dapat dilakukan dengan manipulasi pakan. Jenis bahan makanan yang dapat menurunkan kadar kolesterol adalah golongan makanan yang mengandung serat kasar misalnya jerami, dedak padi, kayu gergaji, rumput laut dan lain-lain. Dari banyak penelitian, suplementasi serat kasar seperti : dedak padi, bubuk kayu gergaji ke dalam ransum, paling banyak dilakukan dalam rangka menurunkan kadar kolesterol pada produk hewan.

Penelitian yang dilakukan oleh Fisher dan Griminger (1986) dan Husseini et all (1976) mendapatkan hasil bahwa serat kasar dapat menurunkan kadar kolesterol darah, sedangkan Turk dan Barnet (1972) berpendapat bahwa serat kasar (alfa-alfa) dapat menurunkan kadar kolesterol kuning telur. Menge at all (1974) mendapatkan hasil bahwa serat kasar yang dicampur selulosa dapat menurunkan kadar kolesterol serum, tetapi meningkatkan kadar kolesterol kuning telur. McNoughton (1978) mendapatkan hasil bahwa serat kasar dapat menurunkan kadar kolesterol kuning telur, tetapi meningkatkan kadar kolesterol hati dan tidak berpengaruh terhadap kadar kolesterol plasma. Sementara itu Piliang, (1990) menyimpulkan bahwa serat kasar (dedak padi) dapat menurunkan kadar kolesterol baik di plasma maupun kuning telur.

Mariani dan Suryani (2004), berpendapat bahwa kulit biji coklat dapat menurunkan kolesterol daging. Udayana (2000) berkesimpulan bahwa serbuk gergaji kayu nyata dapat menurunkan kadar kolesterol telur. Pada penelitian lain Suwidjayana (1999) mendapatkan hasil bahwa serbuk gergaji kayu dan tepung jerami bawang putih dapat menurunkan kadar kolesterol telur secara nyata. Dilaporkan pula oleh Budaarsa (2003) bahwa rumput laut sebagai agen serat kasar juga dapat menurunkan secara signifikan kadar kolesterol daging babi. Penelitian lain mendapatkan hasil bahwa kadar kolesterol daging dan serum broiler turun secara nyata akibat pembatasan konsumsi protein ( Santosa, 2003).

Dari uraian di atas dipandang masih diperlukan penelitian tentang pengaruh bahan asal serat (dedak padi) terhadap kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh ayam dengan kadar serat yang lebih tinggi

metode penelitian

Materi

Tiga puluh ekor DOC jenis CP 707 jantan diberikan pakan starter komersial sampai berumur 2 minggu secara at libitum, dilanjutkan dengan pemberian pakan finisher komersial yang dihancurkan menjadi bubuk at libitum selama 1 minggu. Kemudian dari umur 3 minggu sampai 7 minggu ayam diberi pakan racikan sesuai perlakuan seperti pada Tabel 1. secara at libitum. Ayam dipotong dan sampling dilakukan pada umur 7 minggu (49 hari) meliputi daging (dada dan paha), hati, lemak kulit, lemak abdominal, masing-masing diambil 100 gram, dan darah 5 ml yang diambil dari vena bawah sayap.

Tabel 1. Susunan Ransum Sebagai Perlakuan

Metode

Penentuan kadar kolesterol pada daging, lemak dan serum.

Daging (dada dan paha), hati, lemak kulit, lemak abdominal, masing-masing bahan dikerjakan sendiri-sendiri dihancurkan dengan waring blender. Sampel yang telah hancur diekstraksi (Soklet) menggunakan pelarut kloroform, ekstrak yang didapat ditentukan kadar kolesterolnya menggunakan metode Lieberman-Burchard (Anon, 1983). Dalam metode ini ekstrak (warna jernih) dari beberapa sampel dibagi dua, satu ditetesi dengan larutan Lieberman-Burchard pengukur, satu lagi ditetesi larutan Lieberman-Burchard control. Warna yang muncul dibaca dengan spectrophotometer pada panjang gelombang 340 nm. Dengan demikian diketahui kadar kolesterol pada sampel dalam mg/gr. Penentuan kadar kolesterol serum dilakukan secara langsung (tanpa ekstraksi) menggunakan metode Lieberman-Burchard (Anonimus, 1983).

hasil dan pembahasan

Hasil.

Dengan menggunakan uji Lieb-Burchard didapatkan hasil bahwa pakan yang mengandung dedak padi konsentrasi tinggi berpengaruh menurunkan kadar kolesterol pada daging, kulit dan serum, namun tidak berpengaruh terhadap kadar kolesterol lemak abdominal.dan meningkatkan kadar kolesterol pada hati, disbanding control hasil selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 2 di bawah ini.

Tabel 2. Kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh ayam potong jantan

Keterangan : .Nilai angka dengan huruf yang sama ke arah kolom, menunjukkan tidak berbeda nyata (P > 0,05).

Gambar 1 : Grafik Kadar kolesterol pada beberapa bagian tubuh ayam potong jantan

Pembahasan

Telah diketahui bahwa serat kasar (dedak padi) mempunyai efek hipokolesterolemia melalui peningkatan sekresi cairan empedu, dimana cairan empedu merupakan hasil degradasi eritrosit yang mengandung substansi warna bilirubin, biliverdin dan kolesterol yang dibuang melalui saluran cerna (feses) dan saluran kemih (McNaughton, 1978 dan Menge, et al). Dengan demikian peningkatan sekresi cairan empedu akibat serat kasar dalam saluran cerna akan menurunkan kadar kolesterol tubuh. Dedak padi juga merupakan bahan yang sulit dicerna oleh dinding usus, oleh karena itu dedak padi lebih cepat meninggalkan usus, sehingga mengurangi absorpsi lemak dan kolesterol makanan. Dedak padi juga banyak mengandung pektin yang dapat menghalangi penyerapan kolesterol dari makanan. Dengan demikian akibatnya akan terjadi penurunan deposit lemak (kolesterol) dalam urat daging, kulit sehingga dapat menurunkan kadar kolesterol tubuh (daging, kulit, dan serum).

Namun lain halnya kadar kolesterol pada hati, peningkatkan kolesterol hati diduga karena adanya peningkatan sintesis kolesterol dalam hati akibat terjadinya peningkatan sekresi cairan empedu, dimana kolesterol merupakan komponen yang terkandung dalam cairan empedu.

simpulan dan saran

Simpulan

Terjadi penurunan kadar kolesterol pada daging, kulit, dan serum, peningkatan pada hati, serta tidak berpengaruh pada lemak abdominal terhadap ayam jantan yang diberi formula pakan berdedak padi tinggi.

Saran

Untuk mendapatkan hasil yang lebih baik perlu ditingkatkan jumlah hewan coba dengan metode yang lebih baik.

UCAPAN TERIMAKASIH

Penulis ucapkan terimakasih kepada seluruh staf Laboratorium Fisiologi Veteriner, Unud atas kerjaama dan bantuannya, sehingga terlaksanannya penelitian ini dengan baik.

Daftar Pustaka

Anon, (1983). Direction for use Clinical Chemistry. Diagnostica Merck. E. Merck, P.B. 4119, D-6100. Darmastad1.

Budaarsa, K. 2003. Pengaruh Rumput Laut dalam Ransum terhadap Komponen Karkas dan Kadar Kolesterol Daging Babi. Maj. Il. Pet. Vol. 6, No. 2. Fapet, Unud. p. 62-66

Donaldson, WE. 1985. Lipogenesis and Body Fat in Chicks. Effect of Calori-Protein Ratio and Dietary Fat. Poult. Sci 1. 64 : 1199-1204.

Griminger, P. and H.. Fisher.1986. The Effect of Dried and Fresh Eggs on Plasma Cholesterol and Atherosclerosis in Chickens. Poult. Sci 1. 65 : 979-982.

Husseini, M.D.; WF.Krueger, RC. Fanguy, and JW. Bradly. 1976. Blood Serum and Egg Yolk Cholesterol In Hens as Influenced by Wheat Midllings and Oats in Diets. Poult Sci. 55 : 1995.

Mariani, N P dan N. Suryani. 2004. Pengaruh Penggunaan Pod Kakao yang di Suplementasi Ragi dalam Ransum terhadap Jumlah PAD-FAT dan Kadar Kolesterol Daging Itik Bali. Maj. Il Pet. Vol. 7, No. 2. Fapet, Unud. p. 64-69

McNaughton, J L. 1978. Effect of Dietary Fiber on Egg Yolk, Liver, and Plasma Cholesterol Concentrations of the Laying Hen. In : J. Nutr. 108 : 1842-48.

Menge, H. LH. Littlefield, LH. Frobish, and BT. Weinland. 1974. Effect of Cellulosa and Cholesterol on Blood And Yolk Lipids and Reproductive Efficiency of the Hen. In : J. Nutr. 104 : 1554-1566.

Piliang, W G. 1990. High Fiber Diet and Its Effect on Calcium and Cholesterol Status in Laying Hens. In : Indon. J.Trop. Agric. Vol. 1 (2) : 93-7.

Santosa, U. 2003. Berbagai Tipe Pembatasan Pakan dan Pemberian Pakan Berprotein Berbeda selama Refeeding Menurunkan Penimbunan Lemak Abdominal pada Broiler. Maj. Il Pet. Vol. 6, No. 2. Fapet, Unud. p. 51

Scott, ML; MC Nesheim; and RJ. Young 1982. Nutrition of The Chicken. 3rd Ed. M. L. Scott and Associates. Ithaca, NY.

Steel, R.G.D. and S.H.Torrie. 1981. Principles and Procedures of Statistics A Biometrical Approach. 2nd Ed. McGraw-Hill International Company.

Suwidjayana, I. N. 1999. Pemanfaatan Tepung Jerami Bawang Putih (Allium sativum) dan Serbuk Gergaji kayu dalam Ransum terhadap Kualitas Fisik dan Kadar Kolesterol Telur Ayam. Maj. Il Pet. Vol. 2, No. 1. Fapet, Unud. p. 1

Turk, D.E and BD.Barnett. 1972. Diet and Egg Cholesterol Content. Poultry. Sci. 51, 1881

Udayana, I Dw. Gd. Alit. 2004. Pengaruh Tingkat Serat Kasar dalam Ransum terhadap Kada Kolesterol Telur Ayam. Maj. Il Pet. Vol. 3, No. 1. Fapet, Unud. p. 1-4

Weiss, J F; RM Johnson and EC. Naber.1967. Effect of Some Dietary Factors and Drugs on Cholesterol Concentration in the Egg and Plasma of the Hen. In : J. Nutr. 91 : 119-28.

convert this post to pdf.

Antibacterial Bioactivity Test of Traditional Herb

I Made Merdana

Laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana

Jl. PB. Sudirman Denpasar Bali 80232, e-mail : imade.merdana@yahoo.com

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian terhadap lima jenis tanaman obat tradisional yang dikoleksi dari Desa Tajun, Kecamatan Kubutambahan, Kabupaten Buleleng, Bali dengan cara ekstraksi dan uji bioaktivitas antibakteri terhadap tanaman obat tradisional antara lain : daun kamboja (Plumeria rubra), kedondong (Spondias pinnata), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica), manggis (Garnicia mangostana). Bahan tanaman obat tradisional ini diuji bioaktivitas antibakterinya terhadap Micrococcus luteus dan Eschericia coli, hasilnya dari kelima macam daun tanaman obat di atas yang aktif menghambat pertumbuhan bakteri Micrococcus luteus dan bakteri Escherecia coli adalah tanaman manggis (Garnicia mangostana). Tanaman yang aktif menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli saja adalah : daun kamboja (Plumeria rubra), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica). Sedangkan daun kedondong (Spondias pinnata) tidak mempunyai aktifitas untuk kedua jenis bakteri diatas. Daun manggis mempunyai potensi yang sangat baik untuk menghambat pertumbuhan kedua jenis bakteri uji tersebut. Hal ini terlihat dari luasnya daerah hambatan yang dihasilkan oleh daun manggis (Garnicia mangostana), yaitu 4,63 mm² terhadap Micrococcus luteus dan terhadap Eschericia coli 5,63 mm² pada konsentrasi 105,5 ppm.

Kata kunci : Uji bioaktivitas, antibakteri, obat tradisional

ABSTRACT

The research has been conducted to five kinds of traditional herbs which were collected from Tajun village, Kubutambahan District, Buleleng Regency, Bali. It was conducted through extracting process and antibacterial bioactivity test to the five traditional herbs, naely kamboja (Plumeria rubra), kedondong (Spondias pinnata), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica) dan manggis (Garnicia mangostana). The bioactivities antibaterial of these herbs had been exsperimented toward Micrococcus luteus and Escherichia coli. As the result, the leaves of the herbs which actively hampered the growth of Micrococcus luteus and Eschericia coli bacteria was manggis leaves (Garnicia mangostana). The herb which only hampered the growth of Escherichia coli actively was kamboja leaves (Plumeria rubra), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica). Mean while kedongdong leaves do not have activities to both kins of bacteria. Manggis had a goods potential to hamper the growth of Micrococcus luteus and Eschericia coli. It could be seen from the wide area of obstacle produced by manggis leaves (Garnicia mangostana), namely 4,63 mm² toward Micrococus luteus and toward Eschericia coli 5,63 mm² in 105,5 part of point concentration.

Key word : Bioactivity test, antibacteria, trdisional herbs

PENDAHULUAN

Tanaman obat tradisional di masyarakat Bali telah diinventarisasi ada 168 jenis (Putra, 1950) yang telah diyakini mempunyai khasiat sebagai obat-obatan. Berbagai gejala penyakit dapat disembuhkan seperti sakit perut, sakit kulit maupun jenis penyakit lainnya (Suwardiana, 2002). Penyakit tersebut ada yang disebabkan oleh jamur, bakteri, parasit dan virus.

Beragam jenis tanaman obat telah banyak digunakan untuk pengobatan, tetapi saat ini ada beberapa tanaman obat yang masih sedikit dukungan data ilmiah mengenai khasiatnya, tanaman obat masih menjadi obyek penelitian yang sangat penting dalam pengembangan ilmu farmasi, tidak hanya sebagai bahan aktif dalam obat modern atau sebagai model dasar untuk pengembangan obat modern (WHO 1998). Secara tradisional berdasarkan penggunaan tanaman obat tersebut dapat menyembuhkan beberapa penyakit akibat infeksi oleh jamur maupun bakteri. Hal ini mengindikasikan bahwa dalam tanaman obat tradisional terkandung suatu senyawa yang mempunyai bioaktivitas sebagai antibakteri atau antijamur. Tanaman yang digunakan sebagai obat tradisional diantaranya daun kamboja (Plumeria rubra), kedondong (Spondias pinnata), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica) dan manggis (Garnicia mangostana).

Beberapa tanaman dalam penelitian ini telah dilaporkan mengandung senyawa kimia antara lain flavonoid, alkaloid, terpenoid, steroid dan saponin (Djumidi, 1997; Hutapea, 2000), tetapi belum ada laporan tentang bioaktivitas antibakteri pada tanaman obat tersebut diatas.

Tanaman obat tradisional yang sudah dikenal oleh nenek moyang secara turun-tumurun sangat banyak, akan tetapi masih sedikit adanya laporan mengenai bioaktivitas antibakteri. Penelitian ini dimaksudkan untuk mengetahui adanya bioaktivitas antibakteri pada beberapa tanaman obat tradisional yaitu daun tanaman kamboja, kedondong, kembang sepatu, mangga dan manggis.

METODE PENELITIAN

Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah beberapa jenis daun tanaman obat yang sudah umum dipakai oleh masyarakat untuk bahan obat tradisional, seperti daun kamboja (Plumeria rubra), kedongdong (Spondias pinnata), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica), manggis (Garnicia mangostana). Jenis daun tersebut diambil dari Desa Tajun, Kecamatan Kubutambahan, Kabupaten Buleleng yang merupakan daerah kelahiran penulis.

Bahan kimia yang juga digunakan pada penelitian ini adalah : etanol , asam sufat pekat, asetat anhidrat, kloroform, natrium hidroksida, kalium hidroksida , gel silika, N-heksana, etil asetat, bakteri Micrococcus luteus dan Eschericia coli.

Alat

Alat yang digunakan adalah : cawan petri, botol, timbangan elektrik, autoclave, mikropipet, erlenmeyer, tabung reaksi, gelas ukur, gelas kimia, blender, lumpang, kain kasa, kertas saring, kompor listrik, mikrotube, laminar flow cabinet, seperangkat alat kromatografi kolom dan lampu UV.

Lokasi dan waktu penelitian

Pengambilan sampel dari Desa Tajun, Kecamatan Kubutambahan, Kabupaten Buleleng, Bali, sedangkan untuk ekstraksi dilakukan di Laboratorium Marine Biotechnology dan Laboratorium Bioteknologi Pertanian Pascasarjana Universitas Udayana sejak bulan Januari 2008 sampai Juni 2008.

Metode

1. Penyiapan Bahan

Daun tanaman yang dipakai sampel dikeringkan dengan cara diangin-anginkan di udara terbuka tanpa terkena sinar matahari langsung. Setelah kering lalu dirajang dan selanjutnya diblender sampai terbentuk serbuk halus, kemudian diayak dengan menggunakan ayakan 100 mesh. Hasil ayakan disimpan dalan botol dan ditutup rapat.

2. Ekstraksi senyawa bioaktif

Sebanyak 200 gram setiap serbuk sampel ditimbang dan dimaserasi memakai pelarut etanol (polar) dengan volume 2 kali berat sampel. Tiap jenis sampel dimaserasi dengan etanol sebanyak 3 kali masing-masing selama 24 jam. Kemudian disaring. Filtrat yang diperoleh dikeringkan dengan pengering vakum sampai semua pelarutnya menguap. Ekstrak pekat yang di peroleh dikumpulkan untuk uji hayati.

3. Persiapan uji bioaktivitas

Uji bioaktivitas dilakukan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari jenis daun yang diekstrak, sebelum dilakukan uji bioaktivitas ini dilakukan tahap-tahap sebagai berikut :

a. Penyiapan bahan uji bakteri

Sebanyak 1 ose biakan murni bakteri uji diikubasikan dalam media Nutrien Broth (NB) yang dibuat dengan takaran 50 ml dan dimasukan kedalam erlenmeyer dan biakan ini diinkubasikan kedalam inkubator pada temperatur 30^oC selama 24 jam. Bakteri uji yang digunakan adalah Microccocus luteus dan Eschecia coli, selanjutnya masing-masing biakan ini digunakan dalam uji bakteri.

b. Pebuatan media Uji Nutrient Agar (NA)

Adapun caranya adalah dengan melarutkan media NA kedalam aquadest dengan takaran 23 g per liter. Kemudian media ini disterilkan dalam autoclave pada suhu 121^oC selama 15 menit.

c. Uji Bioaktivitas

Sebanyak 25 ml media NA yang sudah steril di inokulasikan dengan 200 µL biakan bakteri uji yang diambil dari media biak. Kemudian media dengan inokulum bakteri dituangkan ke dalam cawan petri, dan kemudian digoyang-goyangkan untuk memperoleh suspensi bakteri yang homogen pada permukaan nutrient agar, dan dibiarkan sampai padat. Langkah selanjutnya adalah melubangi media agar dengan alat khusus (cork borer). Kemudian disemaikan dengan bakteri penguji. Sampel ekstrak daun tanaman dimasukkan ke dalam masing-masing lubang sebanyak 40 µL, lalu dibiarkan meresap ke dalam lapisan agar dan diberi kode sesuai dengan jenis tanaman yang diuji, kemudian diinkubasikan selama 24 jam pada suhu kamar, sebagai kontrol digunakan pelarutnya. Dalam uji ini hasil positif ditandai dengan terbentuknya daerah bening pada daerah lubang, besar kecilnya zona bening yang terbentuk menunjukkan adanya penghambatan pertanaman bakteri.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Hasil penelitian bioaktivitas antibakteri beberapa jenis tanaman obat tradisional setelah dilakukan uji bioaktivitas terhadap bakteri Microccocus luteus dan Eschecia coli. Hasil uji ditampilkan pada Tabel 3.1.

Tabel 3.1. Hasil uji Bioaktivitas ektrak kental dengan Etanol beberapa jenis tanaman obat tadisional

Daun kamboja (Plumeria rubra), kedongdong (Spondias pinnata), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica) dan manggis (Garnicia mangostana) tersebut diambil dari Desa Tajun, Kecamatan Kubutambahan, Kabupaten Beleleng, Bali.

Dari kelima macam daun tanaman obat di atas yang aktif menghambat pertumbuhan bakteri Micrococcus luteus dan bakteri Escherecia coli adalah tanaman manggis (Garnicia mangostana). Tanaman yang aktif menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli saja adalah : daun kamboja ( Plumeria rubra), kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), mangga (Mangifera indica). Sedangkan daun kedondong (Spondias pinnata) tidak mempunyai aktifitas untuk kedua jenis bakteri. Daun manggis mempunyai potensi yang sangat baik untuk menghambat pertumbuhan kedua jenis bakteri uji tersebut. Hal ini terlihat dari luasnya daerah hambatan yang dihasilkan oleh daun manggis (Garnicia mangostana) yaitu 4,63 mm² terhadap Micrococcus luteus dan 5,63 mm² terhadap Escherecia coli pada konsentrasi 105,5 ppm.

Pembahasan

Dari hasil penelitian terhadap uji bioaktivitas beberapa tanaman obat tradisional yang diambil dari Desa Tajun, Kecamatan Kubutambahan, Kabupaten Buleleng, Bali, ternyata daun manggis (Garnicia mangostana), daun kamboja (Plumeria rubra), daun kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), dan daun mangga (Mangifera indica) memiliki potensi sebagai anti bakteri untuk bakteri Eschericia coli. Khusus untuk tanaman manggis mampu menghambat pertumbuhan kedua jenis bakteri uji sehingga sangat berpotensi sebagai bahan obat tradisional. Tanaman obat tradisional yang diambil dari Desa Tajun, menunjukkan aktivitas antibakteri yang cukup baik terhadap bakteri Microccocus luteus (gram positif) dan Escherichia coli (gram negatif) hal ini dimungkinkan karena Desa Tajun merupakan daerah peralihan kering dan basah dengan curah hujan yang rendah. Daerah bagian utara mendekati daerah pesisir dengan suhu udara panas dan sebagian daerah selatan mendekati daerah pegunungan dengan udara yang lebih lembab dan dingin. Kondisi di atas memungkinkan cekaman yang di alami oleh tanaman obat tradisional ini cukup kuat dengan demikian metabolit sekunder sebagai hasil metabolisme tanaman obat tersebut berkembang dengan baik, dimana kualitas dan kuantitasnya ditentukan oleh pengaruh musim, curah hujan, letak geografi serta habitat tanaman tersebut (Anggadiredja, 2004).

Prescott et al.(1983) menyatakan bahwa kemampuan aktivitas antibakteri juga ditentukan oleh jenis bakteri yang digunakan sebagai bakteri uji dimana bakteri gram positif memiliki membran luar (outer membrane) yang melindungi bakteri dari zat beracun. Pada penelitian ini diperoleh hasil dari lima jenis tanaman yang diuji ada empat jenis tanaman yang menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram negatif, sedangkan untuk bakteri gram positif dari lima jenis tanaman obat tradisional yang di uji diperoleh satu tanaman obat yang menunjukkan aktivitas antibakteri.

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan

Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan sebagai berikut:

1. Hasil uji bioaktivitas antibakteri lima jenis daun tanaman obat tradisional yang di koleksi dari Desa Tajun, ada empat jenis yang menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap Eschercia coli yaitu tanaman manggis, mangga, kamboja dan kembang sepatu.
2. Satu jenis tanaman menunjukan aktivitas antibakteri terhadap Miccroccus luteus dan Escheria coli yaitu tanaman manggis.
3. Satu jenis tanaman tidak menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap kedua bakteri uji yaitu tanaman kedondong.

Saran

Untuk mengetahui lebih mendalam tentang potensi tanaman obat tradisonal yang memiliki bioaktivitas antibakteri perlu dilakukan penelitian yang lebih lanjut dengan menggunakan metode dan bahan uji yang lebih baik dan bervariasi.

DAFTAR PUSTAKA

Anggadiredja, J.T. 2004. Deversity of Antibacterial Subtance from Selected Indenesian Seaweeds. (Desertation). Jakarta: University of Indonesia.

Djumidi, H, (Ed). 1997. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan Sosial RI. Jakarta Jilid III

Hutapea, J.R., (Ed). 2000. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Badan Penelitian dan Pengembangan kesehatan, Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan Sosial RI. Jakarta Jilid I

Prescott, L.M., Harley, J.P., dan Klein, D.A. 1993. Microbiology. 2^nd Edition, Dubuque: Wm. C Brown Publisher.

Putra, S. 1950. Taru Premana. PT. Upada Sastra. Denpasar

Suwardiana. 2002. Naskah Usada sebagai Dasar Pengobatan tradisional Bali dan Problimatika Pemurnian, dalam Teks Simposium Internasional Pernaskahan Nusantara VI. Bandung.

WHO Information Fact Sheet. 1998. Traditional Medecine. Fact Sheet N134, WHO, Jenewa.

convert this post to pdf.]]> http://www.bulletinveteriner.com/uji-bioaktivitas-antibakteri-tanaman-obat-tradisional/feed/ http://www.bulletinveteriner.com/prevalensi-infeksi-cacing-trichuris-suis-pada-babi-muda-di-kota-denpasar/ http://www.bulletinveteriner.com/prevalensi-infeksi-cacing-trichuris-suis-pada-babi-muda-di-kota-denpasar/#comments Wed, 26 Aug 2009 08:31:47 +0000 besung http://www.bulletinveteriner.com/?p=347

Nyoman Adi Suratma.

Laboratorium Parasitologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana

Email : adisuratma@yahoo.co.id.

ABSTRAK

Telah dilakukan pemeriksaan terhadap 300 sampel tinja yang berasal dari babi muda berumur kurang dari 6 bulan, yang diambil secara rambang dari babi-babi pada desa di empat kecamatan yang ada di Kota Denpasar. Pemeriksaan dilakukan dengan metoda pengapungan.

Hasil penelitian menerangkan bahwa prevalensi infeksi cacing Trichuris suis di Kota Denpasar sebesar 32,67 %, dengan intensitas tergolong berat ( rata-rata TTPG = 6166,87 ± 9827.5 ), dalam hal ini prevalensi infeksi pada babi yang dipelihara pada kandang tanah sebesar 52,70 %, dengan intensitas infeksi tergolong berat (rata-rata TTPG = 9818,57 ± 14643,9 ), sedangkan pada babi yang dipelihara pada kandang lantai semen prevalensinya sebesar 26,11 %, dengan intensitas infeksi tergolong sedang ( rata-rata TTPG = 2515,17 ± 5011.12 ). Selain itu juga tampak adanya perbedaan yang sangat nyata ( P < 0,01 ) antara prevalensi infeksi cacing Trichuris suis pada babi yang dipelihara pada kandang tanah dengan kandang lantai semen di Kota Denpasar.

Kata kunci : Trichuris suis, babi muda, lantai kandang

ABSTRACT

Three hundred faecal samples of suckling piglets from 4 districts in Denpasar Bali were examined to identify Trichuris infection by using flotation Method and then were analized with Descriptive analysis and Chi square analysis ( Steel and Torrie, 1991 ).

The prevalence of Trichuris suis infection in suckling piglets in Denpasar was 32,67 % (6166,87 ± 9827.5 EPG). The prevalence of Trichuris infection was significantly higher in pigs were kept on soil floor (52,70 %) than pigs were kept on concrete floor (26,11 %). The prsent study indicated that the infection of Trichuris suis were prevalent in pig were kept on soil floor type.

Key words : Trichuris suis, piglets, floor type

PENDAHULUAN

Ternak babi nerupakan salah satu komoditas penghasil protein hewani yang penting, selain ternak sapi, unggas dan kambing (Anon, 1988). Peternakan babi di Bali dapat berkembang dengan pesat, karena didukung oleh agama dan adat sebagian besar masyarakatnya, khususnya masyarakat Bali pemeluk agama hindu. Dari laporan Dinas Peternakan Propinsi Tingkat I Bali (Anon, 1999), diketahui bahwa populasi babi di Bali dari tahun ke tahun semakin meningkat. Namun dalam perkembangannnya masih selalu dijumpai kendala yang salah satunya adalah aspek penyakit, selain karena managemen yang kurang memadai (Masudana, 1990).

Trichuriasis adalah suatu penyakit akibat infeksi cacing Trichuris suis. Cacing ini umumnya menginfeksi babi muda, terutama babi muda yang berumur maksimal 6 bulan. Trichuris suis mempunyai habitat pada saluran usus dan menghisap darah inangnya, dengan menggunakan semacam kait yang ditusukkan ke dalam lapisan usus sehingga usus mengalami luka. Akibat dari kegiatan ini maka babi muda yang terinfeksi akan mengalami diare berdarah, anemia dan bahkan dapat menyebabkan kematian (Soulsby, 1982; Georgi dan Georgi 1990; Raepstorff dan Nansen, 1998).

Widana (1998) dalam penelitiannya, di Kecamatan Tampak Siring, Gianyar, menemukan 20,62 % dari babi muda yang diamati ternyata terinfeksi oleh Trichuris suis. Sedangkan Nilasasih (2001) dalam penelitiannya pada babi dewasa di Kecamatan Marga, Tabanan dan Kecamatan Payangan menemukan hanya 2,21 % dari babi yang diamati terinfeksi cacing ini. Selain penelitian tersebut di atas masih jarang dilakukan penelitian tentang infeksi Trichuris suis pada babi, khususnya di Bali. Penelitian ini dilakukan bertujuan untuk mengetahui prevalensi infeksi cacing Trichuris suis pada babi muda di Kota Denpasar., serta mengetahui apakah ada hubungan antara prevalensi infeksi cacing Trichuris suis pada babi muda di Kota Denpasar dengan tempat pemeliharaannya. Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan gambaran tentang infeksi cacing Trichuris suis pada babi muda di Kota Denpasar, sebagai langkah awal untuk mengadakan penelitian diseluruh kabupaten di Bali, sehingga dapat memudahkan untuk melakukan penanggulangan penyakit ini.

METODE PENELITIAN

Materi Penelitian

Materi yang dipergunakan dalam penelitian ini adalah tinja yang berasal dari babi muda, jenis landrace berumur kurang dari 6 bulan

Sampel Wilayah

Pengambilan sampel wilayah penelitian (desa) dilakukan secara purposif pada empat kecamatan yang ada di Kota Denpasar, berdasarkan populasi babi dan keberadaan babi muda yang dipelihara pada kandang tanah maupun semen. Adapun desa-desa tersebut adalah, desa Penatih dan Laplap untuk kecamatan Denpasar Timur, desa Ubung Kaja dan Peguyangan untuk kecamatan Denpasar Utara, Desa Padang Sambian dan Kerobokan untuk kecamatan Depasar Barat serta desa Pedungan dan Pemogan untuk kecamatan Denpasar Selatan.

Sampel Babi

Sebanyak 300 ekor sampel babi umur kurang dari 6 bulan yang terdiri dari 74 ekor babi yang dipelihara pada kandang dengan lantai tanah dan 226 ekor babi yang dipelihara pada kandang lantai semen. Pengambilan sampel dilakukan secara rambang dari desa-desa tersampel, selanjutnya dari sampel babi tersebut diambil secara rambang tinja yang baru didefekasikan.

Pemeriksaan Sampel Tinja

Pemeriksaaan sampel tinja babi untuk menentukan bahwa babi yang diperiksa positip terinfeksi Trichuris suis dilakukan dengan menggunakan metoda pengapungan dan untuk pen ghitungan TTPG dilakukan dengan metode Mc Master (Soulsby, 1982) .

Analisis

Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptip dan uji Khi Kwadrat (Steel dan Torrie, 1991).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Prevalensi dan Intensitas Infeksi Trichuris suis

Setelah dilakukan pengamatan terhadap 300 ekor babi muda, ternyata 98 ekor ( 32,67 % ) terinfeksi cacing Trichuris suis. Prevalensi infeksi pada babi yang dipelihara pada kandang tanah adalah sebesar 52,70 %, yaitu terjadi infeksi pada 39 ekor babi dari 74 ekor babi yang diperiksa, sedangkan babi yang dikandangkan pada kandang semen prevalensinya sebesar 26,11 %, yaitu terjadi infeksi pada 59 ekor babi dari 226 ekor babi yang diperiksa.( Tabel 1 ).

Tabel 1. Prevalensi Infeksi Trichuris suis pada babi muda di Kota Denpasar

Rata-rata TTPG (Total telur cacing Trichuris suis per gram tinja ) berkisar antara 50 – 46550 ( 6166,87 ± 9827.5 ), sehingga intensitasnya dikelompokkan dan termasuk katagori berat. Pada babi yang dipelihara pada kandang lantai tanah TTPG berkisar antara 100 – 46550 ( 9818,57 ± 14643,9 ), sehingga intensitasnya dikelompokkan katagori berat, sedangkan pada babi yang dipelihara pada kandang lantai semen TTPG berkisar antara 50 – 21850 ( 2515,17 ± 5011.12 ), sehingga intensitasnya dikelompokkan katagori sedang. Analisis lebih lanjut menerangkan bahwa pada babi yang dipelihara pada kandang tanah, ternyata intensitas infeksinya adalah 23,08 % termasuk infeksi ringan dan masing-masing 38,46 % termasuk infeksi sedang dan berat. Sedangkan pada babi yang dipelihara pada kandang semen intensitas infeksinya adalah 37,29 % termasuk infeksi ringan, 50,85 % termasuk infeksi sedang dan hanya 11, 86 % termasuk infeksi berat (Tabel 2).

Tabel 2. Persentase Intensitas Infeksi Trichuris suis pada Babi Muda di Kota Denpasar

Hubungan antara Prevalensi Infeksi Trichuris suis dengan Lantai Kandang

Hasil uji Khi-kuadrat menerangkan bahwa terdapat ketergantungan yang sangat nyata ( P < 0,01 ) antara prevalensi infeksi cacing Trichuris suis dengan jenis lantai kandang, dalam hal ini prevalensi infeksi pada babi yang dipelihara pada kandang tanah jauh lebih tinggi dibandingkan dengan prevelensi infeksi pada babi yang dipelihara pada kandang semen.( Tabel 1 )

Pembahasan

Prevalensi yang ditemukan pada penelitian ini lebih tinggi dibandingkan dengan yang temukan oleh Widana ( 1998 ) di Tampak Siring Gianyar yaitu sebesar 20,62 % dan oleh Nilasasih ( 2001 ) di Marga Tabanan yaitu sebesar 2,21 % sedangkan pada penelitian yang dilakukan oleh Nganga dkk. (2007) menemukan 32, 2 % dari 115 babi yang diperiksa di Kenya positif terinfeksi Trichuris suis.. Perbedaan yang terjadi disebabkan karena pada penelitian yang dilakukan oleh Nilasasih keseluruhannya dilakukan pada babi yang dipelihara pada kandang semen, pada penelitian yang dilakukan oleh Widana sebagian besar dilakukan pada babi yang dipelihara pada kandang semen yang umumnya diperhatikan dengan baik. Sedangkan pada penelitian ini meskipun sebagian besar penelitian dilakukan pada babi yang dipelihara pada kandang semen, namun sebagian besar pula dari kandang kandang babi tersebut kurang mendapat perhatian dengan baik, sehingga masih memungkinkan berkembangnya telur cacing.

Hasil yang diperoleh terhadap TTPG Trichuris suis menunjukkan, bahwa kondisi kandang, baik pada kandang semen apalagi kandang tanah masih memungkinkan berkembangnya telur cacing dan tinggal pada kandang tersebut, sehingga selalu terjadi infeksi ulang pada babi-babi yang dipelihara pada kandang tersebut.

Terlihat adanya ketergantungan antara prevalensi infeksi cacing Trichuris suis dengan jenis lantai kandang, terjadi karena pada kandang semen kondisinya lebih kering dibandingkan kandang tanah, sehingga perkembangan telur cacing pada kandang tanah akan lebih baik, selain itu pada kandang tanah telur cacing akan melekat dengan lebih baik sehingga jumlah yang pada kandang kandang tersebut akan lebih banyak. Dengan keadaan tersebut maka peluang babi yang dipelihara pada kandang tanah akan lebih besar dibandingkan dengan babi yang dipelihara pada kandang semen.

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa.prevalensi infeksi cacing Trichuris suis di Kota Denpasar sebesar 32,67% dengan intensitas tergolong berat (rata-rata TTPG = 6166,87 ± 9827.5 ) serta terdapat ketergantungan yang antara prevalensi infeksi cacing Trichuris suis dengan jenis lantai kandang..

Saran

Berdasarakan hasil yang diperoleh, disarankan untuk menggunakan kandang semen untuk memelihara babi..

DAFTAR PUSTAKA

Anonimus. 1988. Pedoman Lengkap Beternak Babi. Yayasan Kanisius, Yogyakarta

Anonimus, 1999. Informas Data Peternakan Propinsi DaerahTingkat I Bali. Dinas Peternakan Propinsi Daerah tingkat I Bali

Georgi, G.E. dan M.E. Georgi. 1990. Parasitology for Veterinarians. 5 th. Ed.W.B. Sounders Company.

Masudana, W. 1990. Pengembangan Peternakan Babi di Bali. Dinas Peternakan Propinsi Daerah tingkat I Bali, Denpasar.

Nganga, CJ., DN Karanya., MN Mutune. 2007. The Prevalence of Gastrointestinal Helminth Incetions in Pigs in Kenya. Tropical Animal Health and Production. 40.(5): 331-334

Nejsum,P., SM. Thamsborg., HH Petersen., H. Kringel., MM.Fredholm., A. Ropstorff. 2009. Populations Dynamics of Trichuris suis in Trickle Infected Pigs. Parasitology. 136 (6) 691-697.

Nilasasih, N.P. 2001. Prevalensi Infeksi cacing Nematoda pada babi dewasa di kecamatan Payangan, Kabupaten Gianyar dan kecamatan Marga, Kabupaten Tabanan. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana, Denpasar.

Pedersen, S. dan I.. Saeed. 2001. Acquired Immunity to Trichuris suis Infection in Pigs. Parasitology. 123 (1) 95-101

Pedersen, S. dan I.. Saeed. 2002. Host age Influence on The Intensity of Experimental Trichuri suis Infection in Pigs. Parasite. 9 (1) 75-79

Roepstorff, . dan P. Nansen. 1998. Epidemiology, Diagnosis and Control of Helminth Parasites of Swine. Food and Agriculture Organization of The United Nations. Rome.

Soulsby, E.J.L. 1982. Helminths, Arthropods and Protozoa of Domesticated Animals. 7 th. Ed. William and Wilkin, Bailliere Tindall, London.

Steel, R.G.D. dan J.H. Torrie. 1991. Prinsip dan Prosedur Statistika. Penterjemah Bambang, S. PT Gramedia Pustaka utama Jakarta.

Widana, I.M. 1998. Prevalensi dan Intensitas infeksi Cacing Trichuris suis pada Babi Muda di Kecamatan Tampak Siring, kabupaten Gianyar. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana, Denpasar

convert this post to pdf.

I Gede Soma^1,2, I Nengah Wandia^1,2, I Ketut Suatha^1,2, Sri Kayati Widyastuti^1,2, Aida LT Rompis^1,2, dan Gede Yudhi Arjentinia^1,2

1)Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana

2)Pusat Kajian Primata, Lambaga Penelitian Universitas Udayana, Bukit Jimbaran, Bali

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang dinamika populasi Macaca fascicularis (monyet ekor panjang) di hutan wisata Alas Kedaton dengan menggunakan metode observasi dan sensus. Seluruh populasi monyet ekor panjang yang ada di hutan wisata Alas Kedaton di hitung jumlahnya, dibedakan berdasarkan umur dan jenis kelamin dan diamati untuk menentukan kelompoknya. Jumlah total populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton adalah 364 ekor terdiri atas 54 ekor (14,8%) jantan dewasa, 104 ekor (28,6%) betina dewasa, 164 ekor (45,1%) monyet muda dan 42 ekor (11,5%) anakan, yang terbagi menjadi 4 kelompok sosial yaitu kelompok Parkir, kelompok Utara, kelompok Tengah dan kelompok Selatan. Perbandingan / rasio monyet jantan dewasa dengan betina dewasa adalah 1 : 2. Tingkat kepadatan populasi adalah 30 ekor / Ha. Angka kelahiran monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton sebesar 11,5%.

Kata Kunci: Monyet ekor panjang, Dinamika populasi, Angka Kelahiran, Kepadatan populasi, Rasio jantan-betina

ABSTRACT

Overall population dynamic were observed in identified individuals between August and October 2008, in large group of long failed macaques in the Alas Kedaton, Bali. Total population was 364 monkeys consisted of 54 (14,8%) adult males, 104 (28,6%) adult females, 164 (45,1%) juvenile and 42 (11,5%) infant. They were divided into 4 different small social groups i.e., Parking area group, North area group, Centre area group and South area group. Ratio of adult male and adult female was 1: 2. Population densities of Macaca fascicularis in Alas Kedaton were 30 monkeys / Ha and population natalities were 11, 5%.

Key words: Macaca fascicularis, infant, juvenile, adult, population dynamic, population density, male-female adult ratio, population natality.

PENDAHULUAN

Monyet ekor panjang di Bali berada dalam beberapa populasi lokal yang saling terpisah yang diduga berasal dari Jawa. Migrasinya diperkirakan beberapa kali, dengan migrasi terakhir terjadi ± 18 ribu tahun yang lalu (Eudey 1980; Fooden 1995). Saat ini tidak kurang dari 42 populasi lokal monyet ekor panjang ditemukan di Pulau Bali (Pusat Kajian Primata Universitas Udayana, 2001). Keberadaan monyet ekor panjang di Bali memiliki makna penting bagi masyarakat. Di beberapa tempat dijadikan obyek wisata dan telah berkontribusi nyata bagi peningkatan kesejahteraan masyarakat sekitarnya. Karenanya, mempertahankan keberadaan jangka panjang populasi monyet ekor panjang secara in situ sangat penting dan mesti mendapatkan prioritas perhatian.

Namun bila jumlah monyet ekor panjang melebihi daya tampung (carrying capacity) habitatnya akan menimbulkan efek yang kurang baik kepada monyet itu sendiri, pengunjung, dan masyarakat sekitar. Kepadatan populasi pada satu habitat akan menyebabkan tingginya frekwensi ketegangan, perkelahian dan agresivitas antar anggota sekelompok atau antar kelompok. Hal ini akan membahayakan pengunjung/wisatawan yang datang. Insiden pengunjung tergigit oleh monyet (Wheatley 1989) akan meningkat pada populasi yang demikian. Untuk menghindari ketegangan atau perkelahian, beberapa anggota populasi akan keluar dari habitatnya. Keadaan ini akan merugikan penduduk karena kerusakan pertanian atau perkebunan yang ditimbulkannya (Wandia 2007). Untuk mengatasi konsekuensi negatif kelebihan populasi, usaha penyeimbangan jumlah monyet dengan daya tampung habitat perlu diupayakan. Data demografi atau struktur populasi, luas habitat, dan jumlah pakan yang tersedia (Alikodra 2002) sangat dibutuhkan untuk dapat mewujudkan usaha tersebut.

Alas Kedaton dengan luas lebih kurang 12 ha selain merupakan hamparan hutan sekunder juga merupakan habitat monyet ekor panjang yang keberadaannya di lokasi ini sudah melebihi 30 tahun yang lalu (Kawamoto et al. 1984). Sampai saat ini belum ada data tentang struktur populasi monyet ekor panjang yang ada di Alas Kedaton.

METODE PENELITIAN

Monyet ekor panjang di Alas Kedaton sebagai sampel penelitian, dihitung jumlahnya dengan cara survey dan sensus (Wandia 2007). Koleksi data diawali dengan identifikasi jumlah kelompok sosial berdasarkan pada informasi petugas jaga yang kemudian dikonfirmasi dengan pengamatan pendahuluan. Setelah penentuan kelompok sosial, penghitungan anggota masing-masing kelompok sosial dilakukan secara langsung. Anggota populasi dikelompokkan menjadi empat yaitu jantan dewasa, betina dewasa, muda, dan anakan (Fooden 1995). Monyet jantan ditandai oleh wajah dengan cambang kurang lebat, berkumis, bantalan duduk kiri dan kanan menyatu, dan adanya skrotum (tetes). Monyet jantan dikelompokkan ke jantan dewasa apabila badannya besar, taringnya panjang, dan tingkah lakunya relatif superior. Monyet betina ditandai oleh wajah dengan cambang yang lebat, berjenggot, bantalan duduk kiri dan kanan terpisah, dan adanya vulva vagina. Monyet betina dikelompokkan menjadi betina dewasa apabila ambing dan puting susunya sudah menggelantung (pendulus). Pada kelompok muda, jenis kelamin tidak dibedakan melainkan digabung menjadi satu karena kesulitan untuk membedakannya. Monyet jantan yang badannya lebih kecil dan tingkah lakunya permisif terhadap jantan dewasa yang ada saat itu, dan betina yang belum menunjukkan puting susu menggelantung dikelompokkan sebagai monyet muda. Batas bawah umur monyet muda adalah berubahnya warna rambut hitam di kepala menjadi ke abu-abuan. Sementara, monyet baru lahir dan monyet yang masih memiliki warna hitam pada rambut kepala dikelompokkan sebagai anakan. Jumlah anggota masing-masing kelompok sosial, selanjutnya digabung menjadi satu data populasi lokal. Penghitungan secara langsung bisa dimulai dari kelompok anakan atau jantan dewasa atau lainnya sesuai situasi dan kondisi.

Data yang telah dikoleksi dianalisis secara deskriptif mengenai jumlah kelompok sosial, struktur populasi, dan kepadatannya. Struktur populasi meliputi jumlah anggota populasi lokal, komposisi umur, rasio jantan dewasa dengan betina dewasa, dan angka kelahiran.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Jumlah keseluruhan populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton adalah 364 ekor meliputi jantan dewasa 54 ekor (14,8%), betina dewasa 104 ekor (28,6%), monyet muda 164 ekor (45,1%) dan anakan 42 ekor (11,5%). Populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton terbagi menjadi 4 kelompok sosial yaitu kelompok Parkir, kelompok Utara, kelompok Tengah dan kelompok Selatan. Masing-masing kelompok diberi nama sesuai wilayah yang ditempatinya. Kelompok Parkir berjumlah 87 ekor terdiri atas jantan dewasa 7 ekor, betina dewasa 35 ekor, muda 37 ekor dan anakan 8 ekor, kelompok Utara berjumlah 73 ekor terdiri atas jantan dewasa 11ekor, betina dewasa 18 ekor, muda 34 ekor, dan anakan 10 ekor. Kelompok tengah berjumlah 135 ekor, terdiri atas jantan dewasa 20 ekor, betina dewasa 35 ekor, muda 64 ekor, dan anakan 16 ekor. Kelompok Selatan berjumlah 69 ekor, terdiri atas jantan dewasa 16 ekor, betina dewasa 16 ekor, muda 29 ekor dan anakan 8 ekor (Table 1 ).

Tabel 1. Data Jumlah Monyet ekor panjang (Macaca fascicularis) berdasarkan umur pada tiap kelompok di Hutan Wista Alas Kedaton

Pembahasan

Dari data yang diperoleh seperti paparkan pada Tabel 1 dan Gambar 1, secara umum tampak kelompok umur muda menempati jumlah yang paling tinggi (45,1%). Hal yang sama juga tampak pada tiap kelompok monyet (Gambar2). Kelompok Parkir merupakan kelompok baru. Pada tahun 2001 monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton hanya ada 3 kelompok yaitu kelompok Tengah, kelompok Selatan dan kelompok Utara (Pusat Kajian Primata, 2001). Tingginya jumlah monyet ekor panjang umur muda serta adanya kelompok baru (kelompok Parkir) menunjukkan populasi monyet ekor panjang yang ada di hutan wisata Alas Kedaton merupakan populasi yang berkembang (progressive population) dengan tingkat angka kelahiran sebesar 11,5% .

Secara umum rasio jantan dewasa dengan betina dewasa adalah 1 : 2. Pada masing-masing kelompok rasio jantan dewasa dengan betina dewasa berturut-turut adalah sebagai berikut kelompok Parkir 1 : 5, kelompok Utara 1: 2, kelompok Tengah 1 : 2 dan kelompok Selatan adalah 1: 1. Monyet ekor panjang merupakan satwa yang hidup berkelompok dengan banyak jantan (multi male group). Rasio jantan dengan betina yang demikian juga ditemukan pada Macaca mulatta (Napier dan Napier, 1985). Tingginya jumlah pejantan sering menyebabkan tingginya tingkat ketegangan / perkelahian dalam memperebutkan betina birahi. Pejantan yang kalah dalam persaingan akan meninggalkan kelompoknya / bermigrasi keluar tempat kelahirannya dan membuat kleompok baru (Swindler, 1998). Tampaknya hal itu tidak terjadi sepenuhnya pada populasi monyet ekor panjang yang ada di hutan wisata Alas Kedaton. Ini bisa terjadi karena secara geografis hutan wisata Alas Kedaton merupakan hutan yang terisolasi ada ditengah-tengah perkampungan penduduk dan cukup sumber pakan karena diberikan pakan tambahan oleh pengelola hutan wisata.

Kepadatan populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton yaitu 30 ekor / Ha, jauh melebihi batas kepadatan maksimum di habitat liar. Pada kawasan liar tanpa ada pakan tambahan daya tampung maksimum sekitar 1000 kg biomasa / Km² atau sekitar 333 ekor/km2 dengan rataan berat monyet 3 kg, atau sekitar 3 – 4 ekor /Ha (Lesson at al. 2004). Kepadatan yang tinggi akan meningkatkan ketegangan dan agressivitas diantara anggota populasi (Alikodra, 2002).Tingginya ketegangan diantara anggota populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton telah menyebabkan terbentuknya kelompok baru yang menempati areal parkir. Terbentuknya kelompok Parkir ini mencerminkan wilayah hutannya sudah tidak mampu lagi menampung jumlah populasi. Tingginya tingkat kepadatan ini besar kemungkinan akibat adanya sumber pakan tambahan dan habitat yang terisolasi. Tersedianya sumber pakan yang cukup akan menyebabkan rata-rata jumlah populasi per satuan luas habitat akan meningkat. Namun peningkatan jumlah populasi akan dibatasi oleh menurunnya tingkat kenyamanan yang menyebabkan keluarnya beberapa anggota populasi walaupun sumber pakan relatif cukup tersedia. Keadaan ini akan merugikan penduduk karena kerusakan pertanian atau perkebunan yang ditimbulkannya (Wandia 2007).

Gambar 1.Diagram Batang Monyet Ekor Panjang Berdasarkan Dinamika Umur di Hutan Wisata Alas Kedaton

Gambar 2. Diagram Batang Monyet Ekor Panjang Berdasarkan Dinamika Umur di Hutan Wisata Alas Kedaton pada tiap Kelompok

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

1. Jumlah populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton adalah 364 ekor, terdiri atas 54 ekor (14,8%) jantan dewasa, 104 ekor (28,6%) betina dewasa, 164 ekor (45,1%) monyet muda dan 42 ekor (11,5%) monyet anakan.

2. Populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton terbagi dalam 4 kelompok sosial yaitu kelompok Parkir, kelompok Utara, kelompok Tengah dan Kelompok Selatan.

3. Rasio jantan dewasa dengan betina dewasa monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton adalah 1:2

4. Tingkat kepadatan populasi monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton yaitu 30 ekor / Ha.

5. Angka kelahiran monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton sebesar 11,5%.

Saran

Tingginya tingkat kepadatan monyet ekor panjang di Hutan Wisata Alas Kedaton perlu mendapat perhatian dan segera dilakukan pembatasan populasi seperti dengan relokasi atau cara lain sehingga dampak negatif yang ditimbulkan dapat dihindari dan kelestarian monyet ekor panjang di hutan wisata Alas Kedaton tetap dapat terjamin.

UCAPAN TERIMAKASIH

Penulis mengucapkan terimakasih kepada Lembaga Penelitian Universitas Udayana yang telah mendanai penelitian ini dengan Dana DIPA Universitas Udayana tahun anggaran 2008 dengan Nomor. 001652/H.14.11/PG/2008 Tertanggal 26 April 2008. Ucapan terimakasih juga penulis sampaikan kepada Bendesa Adat Kukuh, Kepala Desa Kukuh dan Pengelola hutan wisata Alas Kedaton atas izin dan kerjasamanya serta adik- adik mahasiswa yang telah ikut serta membantu dalam pelaksanaan penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKA

Alikodra HS. 2002. Pengelolaan Satwaliar. Jilid I. YPFK. Bogor.

Eudey AA. 1980. Pleistocene glacial phenomena and the evolution of Asian macaques. In The Macacaques. Studies in Ecology, Behavior and Evolution. Edited by D.G. Lindburg. :52-83.

Frankham R, Ballou JD, Briscoe DA. 2004. A Primier of Conservation Genetics. Cambridge University Press. Cambridge.

Fooden J. 1995. FIELDIANA. Zoology. New Series No. 81. Systematic Review of Southeast Asian Longtail Macaques, Macaca fascicularis (Raffles, [1821]). Published by Field Museum of Natural History. USA

Hartl DL and Clark AG. 1997. Principles of Population Genetics. Third ed. Snauer Associates, Inc. Publishers. Sunderland, Massachusetts.

Kawamoto Y, Ischak TM, Supriatna J. 1984. Genetic variation within and between troops of the crab-eating macaque (Macaca fascicularis) on Sumatra, Jawa, Bali, Lombok and Sumbawa, Indonesia. Primates, 25(2):131-159.

Klug WS & Cummings MR. 2005. Essentials of Genetics. International Ed. 5^th Ed. Pearson Education, Inc. USA.

Lesson C, Kyes RC., Iskandar E. 2004. Estimating population density of Longtailed macaques (Macaca fascicularis) on Tinjil Island, Indonesia, using the line transect sampling method. Jurnal Primatologi Indonesia 4(1):7-14.

Li WH. 1997. Molecular Evolution. Sinauer Associates Inc. Publisher. Sunderland, Massachusetts, USA.

Napier, J.R dan Napier, P.H. 1985. The Natural History of the Primates.British Museum (Natural History), Crowmwell Road, London.

Nozawa K, Shotake T, Minezawa M, Kawamoto Y, Kawamoto K, dan Kawamoto S. 1996. Population-genetic studies of the Javanese macaque, Macaca fuscata. In: Variations in the Asian Macaques. T. Shotake and K. Wada (eds.). Tokai University Press. Tokyo, Japan.: 1-36.

Pusat Kajian Primata, Universiras Udayana. 2001. Map of Long Tailed Macaque Populations in Bali. Pusat Kajian Primata Lembaga Penelitian Universitas Udayana. Bali.

Rowe.N. 1996. The Pictorial Guide to the Living Primates. Pogonias Press. New York.

Swindler, D.R. 1998. Introduction to the Primates. University of Washington Press, Seatle dan London

Wandia I N. 2007. Struktur dan Keragaman Genetik Populasi Lokal Monyet Ekor Panjang (Macaca fascicularis) di Jawa Timur, Bali, dan Lombok. Disertasi. PRM. IPB. Bogor. 2007.

Wheatley BP. 1989. Diet of Balinese temple monkeys, Macaca fascicularis. Kyoto University Overseas Research Report of Studies on Asian Non-Human Primates. Kyoto University Primate Research Institute. No. 7:62-75.

convert this post to pdf.

I Gusti Ketut Suarjana

Laboratorium Bakteriologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jumlah bakteri Coliform dalam air minum ternak ayam petelur di Desa Piling Kecamatan Penebel, Kabupaten Tabanan di tinjau dari jumlah bakteri Coliform. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Kelompok dengan tiga lokasi pengambilan sampel yaitu sumber air(sungai), tempat penampungan air dan tempat minum dan pengulangan sebanyak 10 kali sebagai kelompok. Jumlah bakteri Coliform dihitung menurut metode Most Probable Number (MPN) dengan seri sembilan tabung. Data jumlah Coliform dianalisis dengan Sidik Ragam dan dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa jumlah bakteri Coliform pada sumber air, tempat penampungan.dan tempat minum berturut-turut : 11240 MPN/100 ml, 19800 MPN/100ml dan 35600 MPN/100ml. Selanjutnya secara statistik menunjukkan bahwa jumlah Coliform pada setiap lokasi berbeda sangat nyata(P<0,01). Jumlah Coliform pada tempat minum sangat nyata lebih tinggi (P<0,01) dari pada jumlah Coliform pada tempat penampungan dan sungai. Demikian juga jumlah Coliform pada tempat penampungan air sangat nyata (P<0,01) lebih tinggi dari pada sungai.

Kata kunci: Coliform, MPN, Peternakan ayam petelur

ABSTRACT

A study was carried out to evaluate the water quality in layer farming at Piling Village, Distric and Regency of Tabanan, based on number of Coliform bacteria. The study was block randomized design was asigned in this study. Water samples were collected from three sourcess, river, water reservoir and drinking water of pen.Samples were collected in 10 time. The Coliform analysed by most probable number (MPN) Method with nine tube series.

The result of this study showed that number of Coliform in river, reservoir and place of drinking water were 11240 MPN/100 ml, 19800 MPN/100 ml and 35600 MPN/ 100 ml respectively. Statisticcaly of this study showed amount of Coliform in drinking water of farm layer significant highest (P<0,01) than those reservoir and river. Amount of Coliform in reservoir significant highest (P<0,01) than those river.

Keyword : Coliform, MPN, Layer Farming

PENDAHULUAN

Bakteri Coliform tergolong ke dalam famili Enterobacteriaceae bersifat Gram negatif berbentuk batang, memfermentasi laktosa, fakultatif anaerob dan suhu optimumnya 37⁰C (Buckle,et al.,1997). Menurut Jawetz dkk.(1980) Coliform terdiri dari Escherichia coli ( E. coli), Klebsiella, Enterobacter dan Citrobacter. Didalam Grup Coliform ini Citrobacter memiliki sifat paling lambat memfermentasi laktosa sehingga memerlukan waktu inkubasi lebih dari 24 jam bahkan sampai dua kali 24 jam.Coliform merupakan mikroorganisme komensal atau sebagai flora normal yang terdapat dalam saluran pencernaan hewan dan manusia. Bakteri ini dipakai sampai sekarang dipakai sebagai indikator tingkat sanitasi suatu produk bahan makanan maupun minuman yang dikonsumsi oleh hewan maupun manusia. Produk bahan-bahan pakan yang berasal dari ternak cendrung lebih mudah terkontaminasi oleh Coliform dari pada bahan-bahan yang bukan berasal dari ternak. Demikian pula air yang dipergunakan untuk keperluan manusia dan ternak mudah terkontaminasi oleh feces hewan/manusia yang mengandung bakteri Coliform. Jumlah bakteri Coliform yang ditetapkan sebagai standar mutu bahan makanan atau pakan maupun air minum pada suatu negara berbeda dengan negara lain. Negara yang sudah maju atau modern sudah jelas akan menekan jumlah bakteri ini seminim mungkin. Indonesia sebagai negara berkembang telah menetapkan baku mutu air berdasarkan Perturan Pemerintah Nomor 82 Tahun 2001 diantaranya baku mutu air peternakan yang dikatagorikan sebagai air Kelas II ditinjau dari mikrobiologis dengan jumlah bakteri Coliform adalah 5000 MPN/100 ml.

Berbagai mikroba patogen seringkali ditularkan melalui air yang tercemar sehingga dapat menimbulkan penyakit pada manusia maupun hewan. Mikroba ini biasanya terdapat dalam saluran pencernaan dan mencemari air melalui feces. Ada beberapa bakteri di dalam grup Coliform yang merupakan ancaman kesehatan bagi manusia maupun ternak. Serotipe E. coli patogen seperti O8, O9, O141, O149, O157,dsb. Demikian juga Klebsiella pnemunia telah diketahui sebagai penyebab radang paru-paru pada hewan dan jarang dijumpai pada manusia. .

Metode MPN dipergunakan untuk uji kualitas mikrobiologi air. Metode ini merupakan uji deretan tabung yang menyuburkan pertumbuhan Coliform sehingga diperoleh nilai untuk menduga jumlah Coliform dalam sampel yang diuji. Dalam metode MPN dikenal dua uji yaitu uji duga dan uji penegasan atau uji peneguhan. Uji duga dinyatakan positif apabila sampel yang ditanam dalam masa inkubasi dua kali 24 jam memfermentasi laktosa dan memproduksi gas dalam medium tersebut. Selanjutnya uji penegasan dilakukan dengan mengidentifikasi lebih lanjut bakteri tersebut dengan uji biokimia seperti uji IMViC atau memupuk pada media selektive seperti Eosin Methyline Blue Agar( EMBA) dan Mac Conkey Agar. Uji positif menghasilkan angka indeks yang disesuikan dengan tabel MPN seri9 tabung atau tiga pengenceran sampel masing-masing menggunakan tiga tabung.

MATERI DAN METODE

Materi

Bahan-bahan berupa sampel air peternakan masing-masing 100 ml yang diambil dari tiga lokasi yaitu air sungai, tempat penampungan dan tempat minum. Bahan yang lain : kapas, tisu, alkohol 70%, kertas aluminium. Media yang dipergunakan meliputi aquades steril, Mac Conkey broth dan EMBA.

Alat-alat meliputi : tabung reaksi, erlenmeyer, autoclave, timbangan, pipet ukur,ose, inkubator, termos es.

Metode

Metode penelitian yang dipergunakan menurut Fardiaz (1993). Masing-masing sampel diambil secara legeartis, aseptis, dan komposit. Pengambilan sampel dilakukan sebanyak 10 kali dengan interval setiap 5 hari. Sampel dikerjakan sebagai.berikut :

1. Masing-masing sampel terlebih dahulu dihomogenkan dan diencerkan 10^-2, 10^-3, 10^-4

2. Siapkan masing-masing pengenceran tiga tabung yang berisi 10 ml Mac Conkey broth (MCB)

3. Inokulasikan masing-masing 1 ml sampel kedalam tabung MCB

4. Inkubasikan tabung-tabung tersebut dalam inkubator suhu 37^oC selama 24 jam.

5. Amati dan catat hasilnya pada masing-masing tabung. Apabila positif akan ditandai Medium menjadi keruh warnanya dari merah menjadi kuning disertai adanya gas di. Dalam tabung Durham. Apabila belum dijumpai tanda-tanda tersebut maka tabung-tabung tersebut diiinkubasikan lagi 1x 24 jam.

6. Masing-masing tabung yang positif diinokulasikan dengan ose steril ke edium EMBA kemudian diinkubasikan dalam inkubator suhu 37^o C selama 24 jam.Koloni Coliform tumbuh berwarna coklat keabu-abuan hijau metalik atau kecoklatan seperti mata ikan.

7. Catat masing-masing tabung yang positif dari masing-masing sampel selanjutnya disesuaikan dengan nilai kombinasi dalam tabel MPN dan catat nilai MPN.

8. MPN mikroba

Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) dengan tiga lokasi pengambilan sampel dan dilakukan pengulangan sebanyak 10 kali sebagai blok.

Analisis Data

Data jumlah Coliform dianalisis dengan uji Sidik Ragam dan apabila terdapat perbedaan yang nyata dilanjutkan dengan uji Jarak Berganda Duncan

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil

Data jumlah coliform yang terdapat dalam air peternakan ayam dapat dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Jumlah Bakteri Coliform (MP[N/ml) Air Peternakan Ayam Petelur UD Aditya Desa Piling Kecamatan Penebel Kabupaten Tabanan

Pembahasan

Jumlah Coliform pada sungai tempat penampungan dan tempat minum berturut-turut 11240 MPN / 100 ml, 19800 MPN / 100 ml dan 35600 MPN / 100 ml. Jumlah Coliform pada setiap lokasi melampaui batas baku mutu air peternakan (kelas II) sesuai dengan Peraturan Pemerintah RI No 82 tahun 2001, yaitu 5000 MPN / 100 ml. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian Rastina (2004) jumlah Coliform yang dijumpai pada air sungai Yeh Ho di Tabanan masih tinggi (23000 MPN / 100 ml). Diduga ada beberapa faktor penyebabnya meliputi sungai yang mengalir disekitar tempat pemukiman penduduk dipergunakan untuk membuang sampah atau kotoran ternak maupun manusia dan aktivitas lainnya seperti memandikan ternak, mencuci alat - alat pertanian

Hasil uji sidik ragam menunjukkan bahwa lokasi pengambilan sampel berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap jumlah bakteri Coliform air peternakan ayam. Air sungai yang dipergunakan banyak mengandung bahan-bahan organik yang penting untuk pertumbuhan mikroorganisme seperti protein, karbohidrat dan lemak. Menurut Pelczar,dkk.(1993) dan Waluyo (2005) bakteri tumbuh dan berkembang biak membutuhkan sumber makanan seperti protein, karbohidrat dan beberapa faktor penting lain seperti suhu, aerasi dan pH. Selanjutnya air sungai sebagai sumber air peternakan dialirkan melalui selokan dan pipa ke tempat penampungan. Tempat penampungan seperti kolam tidak permanen, terbuka dan air belum diolah. Selanjutnya air ini dipergunakan untuk air minum ternak ayam.

Hasil Uji Jarak Berganda Duncan terhadap lokasi pengambilan sampel menunjukkan bahwa jumlah Coliform pada tempat minum berbeda sangat nyata (P<0,01) lebih tinggi dari pada tempat penampungan maupun sungai. Jumlah Coliform pada tempat penampungan sangat nyata (P<0,01) lebih tinggi dari pada sungai. Jumlah Coliform yang tinggi pada tempat minum mengindikasikan bahwa sanitasi kandang masih jelek. Kandang yang jarang dibersihkan terutama tempat minum akan mudah terkontaminasi oleh bahan-bahan infektif seperti debu kandang, kotoran dan bahan pakan yang merupakan bahan nutrisi untuk pertumbuhan bakteri. Secara fisik tempat penampungan belum permanen dan terbuka juga sebagai pemicu jumlah Coliform pada tempat tersebut tinggi. Jumlah Coliform pada sungai lebih rendah dari pada dua lokasi yang lain karena tipe air sungai bergerak atau mengalir sehingga bakteri lebih sulit berkembang biak secara optimal. Disamping itu bakteri pada umumnya mengendap atau terbawa oleh bahan- bahan yang mengendap di bagian bawah permukaan sungai atau mati oleh detergen yang dipergunakan sebagai bahan mencuci oleh manusia ( Slamet, 1994).

Jumlah Coliform yang tinggi pada air peternakan ayam dapat sebagai pemicu ancaman kesehatan ternak ayam. Penyakit yang paling sering muncul dan bersifat endemis pada unggas terutama ayam adalah kolibasilosis yang disebabkan oleh E. coli patogen dan penyakit saluran pencernaan lainnya yang disebabkan oleh Coliform lainnya. Penyakit saluran pencernaan atau kolibasilosis dapat menimbulkan kerugian ekonomi berupa penurunan berat badan, biaya ekonomi meningkat bahkan dapat menyebabkan kematian ternak (Tabbu, 2000)

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan jumlah bakteri Coliform yang sangat nyata (P<0,01) pada setiap lokasi pengambilan sampel. Jumlah Coliform pada tempat minum, tempat penampungan dan sungai berturut-turut : 35600 MPN/100ML, 19800 MPN/100ml dan 11240 MPN/100 ml.

Saran

Jumlah Coliform pada setiap lokasi pengambilan sampel telah melampui batas yang ditetapkan oleh pemerintah sesuai dengan baku mutu air peternakan ditinjau dari jumlah Coliform sebesar 5000 MPN/100ml, oleh karena perlu pengawasan dan peningkatan sanitasi kandang.

UCAPAN TERIMA KASIH

Terima kasih saya ucapkan kepada Carmelia Theresia Avilla Uge Djawa atas bantuan teknis yang diberikan sehingga penelitian ini dapat diselesaikan dengan baik.

DAFTAR PUSTAKA

Buckle K.A.; Edward, R.A.; Fleet, G.H. and Wootanto, M. 1997. Food Science. Australian Vice-Chacellons Comite. pp. 120-130

Fardiaz, S. 1993. Analisis Mikrobiologi Pangan. Penerbit PT. Raja Grafindo Persada, Jakarta.

Jawetz, E., Melnick, J.L. and Alberg, E.A. 1980. Review of Medical Microbiology. 14 th ed., Los Altos, California 94022. Lange Medical Publication.

Pelczar Jr, M.J., Chan, E.C.S. and Krieg, N.R., 1993. Microbilogy Concepts and Applications.

Rastina, I.K. 2004 Tesis Studi Kualitas Air Sungai Ho Kabupaten Tabanan. Program Pasca Sarjana Program Studi Ilmu Lingkungan Universitas Udayana, Denpasar.

Slamet, J.S., 1994. Kesehatan Lingkungan. Cetakan Pertama. Penerbit Gadjah Mada University, Press. Yogyakarta.

Tabbu, C.R., 2000. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya. Penyakit Mikal, Bakterial, Viral. Kanisius Yogyakarta.

Waluyo, L.., 2005. Mikrobiologi Lingkungan. Cetakan Pertama

convert this post to pdf.